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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
27
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人关节滑膜成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX9882 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| NCI-H1395人肺腺癌细胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 上皮细胞生长添加物MEpiCGS |
| 人脑微血管内皮细胞cDNAHBMEC cDNA | 丝氨酸蛋白酶10抗体 |
| 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4 | eIF4E结合蛋白抗体 |
| SAC-II C3细胞,小鼠腹水瘤细胞 NRK(大鼠肾细胞) 人胚胎膀胱组织来源细胞;CCC-HB-2 | 胰岛细胞抗原12/核转录因子SOX13抗体 |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞(拉祜族);KM9406 人冠状动脉内皮细胞完全培养基 100mL | 20号染色体开放阅读框128抗体 |
| IL2RB Others Canine 狗 IL2RB / IL2 Receptor beta 人细胞裂解液 (阳性对照) | 棕榈酰化膜蛋白5抗体 |
| B16小鼠黑色素瘤细胞 B16 mouse melanoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 肿瘤转移抑制蛋白1抗体 |
| ACHN(人肾癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R043大鼠小肠平滑肌细胞完全培养基100mL 人胚肺二倍体细胞;HEL-1 | 甘氨酸转运蛋白1抗体 |
| 人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937] 大鼠外周血白细胞完全培养基 100mL | 酸化Bax抗体 |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF 人关节软骨细胞完全培养基 100mL | NOGO相互作用粒体蛋白1抗体 |
| EGFL6 Others Human 人 EGFL6 / EGF-L6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 脱氧核糖核酸酶1抗体 |
| CM-H095人骨骼肌细胞完全培养基100mL | 类疱疹病毒8 ORF14抗体 |
| 人关节滑膜成纤维细胞HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 细胞色素b5还原酶3抗体 |
| 前列腺癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml | KT3 tag抗体 |
| MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 细胞角蛋白10抗体 |
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文献和实验正常关节和几种常见关节炎时滑膜液的特征,如图: 颜色透明度 粘稠度 粘蛋白凝块 细胞计数及分类 蛋白质 糖 结晶 细胞涂片或培养 正常关节 淡黄
丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
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