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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
20
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠神经干细胞 | T25瓶 | LZ-YX9628 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 小鼠血细胞;WEHI-3 [WEHI3] | 小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) |
| FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) | α内磺肽抗体 |
| PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 膜相关环指蛋白1抗体 |
| CL-0129Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2 | 黑色素瘤硫酸软骨素蛋白多糖4抗体 |
| NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 标签) | 细胞周期蛋白依赖性激酶样3抗体 |
| CM-R079大鼠冠状动脉平滑肌细胞完全培养基100mL | 动力相关蛋白1抗体 |
| 小鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基 100mL | 生长休止特定蛋白2抗体 |
| 人肺成纤维细胞总RNAHPF NA | 淋巴细胞抗原Ly6c抗体 |
| 人牙周膜成纤维细胞完全培养基 100mL | 早老素γ分泌酶抗体 |
| P3X63Ag8 小鼠骨髓瘤细胞 | 补体应答基因32抗体 |
| NCI-H661(人大细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 醛固酮还原酶家族1成员C3抗体 |
| Hs-578T细胞,人癌细胞 SD大鼠骨髓间充质干细胞,SDBMSC细胞 Hep-2, 人喉癌细胞系 | 剪接因子,精氨酸/丝氨酸丰富19 |
| 大鼠神经干细胞EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 | 血清型免疫球蛋白A抗体 |
| T6-Swiss albino细胞,小鼠胚胎成纤维细胞 B16(小鼠黑色素瘤细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 | 甘油吸收/转运蛋白GUP1抗体 |
| 小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记) | 同源结构域转录因子HESX1抗体 |
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文献和实验一、SD大鼠的麻醉 1、SD大鼠腹腔麻醉 把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。 乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。 乳化异氟烷,大鼠
大鼠麻醉后,背部脱毛,于 T9-T11 胸椎区域消毒,划约 2-3cm 纵行切口,咬除椎板,暴露硬脊膜,将大鼠固定于多功能鼠固定台,应用脊髓打击器撞击骨髓(打击高度 12mm,重量 10g)大鼠出现尾部痉挛性摆动,表明造模成功。造模后,对各组大鼠进行脊髓损伤的行为学评分,利用斜板实验评测动物脊髓损伤后神经功能恢复情况,分析在脊髓损伤不同时期的变化规律。
大鼠(Rat),啮齿目、鼠科、大鼠属,属野生褐色大鼠(Rattus norvegicus) 的变种。原产于亚洲中部及原苏联部分的温暖地区。十八世纪后期开始人工饲养,十九世纪中叶首次用于心理学的研究。1906年这个鼠群中的一部分被送到费城(Philadelphia)的Wistar研究所,从而培育成了Wistar大鼠。二十世纪以后,大鼠应用于生命科学研究的各个领域,尤其在肿瘤学、药理学、内分泌学、营养学方面应用最为广泛。第一节、生物学特性一、一般特性1、大鼠性情温顺,易于捉取,一般不会主动咬人
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