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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
34
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人结肠癌组织源细胞 | T25瓶 | LZ-YX9486 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人胚肾细胞;293 [HEK-293] | NCI-H23细胞,人非小细胞肺癌细胞 小鼠成纤维细胞,3T3NIH细胞 CM-R087大鼠软骨细胞完全培养基100mL |
| BPIFB1 Others Human 人 BPIFB1 / LPLUNC1 人细胞裂解液 (阳性对照) | γ-氨基A受体相关膜蛋白3 |
| TE-11细胞,食管癌细胞 人食管癌细胞,CaEs-17细胞 大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J | 脑蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶29抗体 |
| 5637, 人膀胱癌细胞 Human | 环指蛋白111抗体 |
| 大鼠背脊髓神经元RN-dsc | 酰基辅酶A硫酯酶8 |
| 人葡萄膜黑色素细胞;UM | 多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10抗体 |
| 猫肾细胞;CRFK | 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL6抗体 |
| 小鼠食管上皮细胞完全培养基 100mL | 酸化DNA损伤修复基因XRCC9抗体 |
| 人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] | 真核翻译起始因子2C1抗体 |
| 牛肾细胞;MDBK | 沉默调节蛋白5抗体 |
| IL18BPa 蛋白 (His & Fc 标签) | IL18BP Protein Human 重组人 |
| BNL CL.2小鼠胚胎肝细胞 BNL CL.2 mouse embryo liver cells DMEM培养基+10%FBS | 结合转化激活因子CITED1抗体 |
| 人结肠癌组织源细胞OP9(小鼠骨髓基质细胞) 5×106cells/瓶×2 | 岩藻糖转移酶2抗体 |
| SUNE-1亚株13-9B细胞,人鼻咽癌细胞系 小鼠胚胎成纤维细胞,BALB/3T3 clone A31细胞 CM-H063人肾皮层上皮细胞完全培养基100mL | 干扰素相关发育调节因子2抗体 |
| RKO(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 脱酸辅酶A结构域蛋白抗体 |
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