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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
51
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人气管平滑肌细胞 | T25瓶 | LZ-YX9464 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人雪旺细胞HSC | SGC-7901细胞,胃腺癌细胞 人食管癌细胞,Eca-109细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] |
| RKO-AS45-1细胞,人结肠癌转基因细胞 人恶性黑色素瘤细胞,A375细胞 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1 | γ干扰素诱导单核细胞因子抗体 |
| APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人细胞裂解液 (阳性对照) | 脑海绵状血管畸形蛋白2抗体 |
| 结肠癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml | 环指蛋白135抗体 |
| 肺大静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 限局性核因子3抗体 |
| 人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1 | 多腺苷二酸多聚酶抗体/多聚ADP-核糖聚合酶1 |
| CL-0394NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 受体蛋白酪氨酸酸酶F抗体 |
| 人上皮细胞裂解物HMEpiCL | 酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体 |
| 大鼠表皮角化细胞完全培养基 100mL | 真核翻译起始因子4G抗体 |
| tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3 | 成纤维细胞激活蛋白α抗体 |
| 狗肺成纤维样细胞;DogL1 | 溶酶体蛋白跨膜β4抗体 |
| HCC1428细胞,人癌细胞 人小细胞肺癌细胞,LTEP-P细胞 晶状体上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 金属离子转运体1抗体 |
| 人气管平滑肌细胞IFNA8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (Fc 标签) | 羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗体 |
| Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮细胞 Mv.1.Lu (NBL-7) mink lung epithelial cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1抗体 |
| 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5 | 脱氧尿嘧啶三酸核苷水解酶抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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动脉平滑肌细胞 (Arterial smooth muscle cells)
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实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜
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