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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
50
- 供应商:
AbMole
- CAS号:
321673-30-7
- 规格:
5mg
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文献和实验cells)-HIS 模型; 3. 移植胎儿胸腺和胎肝到经过辐照的重度免疫缺陷小鼠肾包膜下,同时接种人的骨髓造血干细胞进行免疫重建,即 BLT(Bone marrow–Liver–Thymus)-HIS 模型。BLT-HIS 模型受限于材料来源和伦理,目前多应用于基础科研。 图 1:三种方式免疫重建小鼠[1] B-NDG 小鼠(NOD.CB17-PrkdcscidIl2rgtm1/Bcgen)在 NOD-scid 遗传背景敲除了 IL2rg 基因,缺乏成熟 T、B 和 NK 细胞
淋巴细胞,经一定时间作用后,CTL被活化,收集培养上清液,加入含DTNB的缓冲液(底物为BLT),采用分光光度计检测酶的活性,并计算抗TCR诱导的酯酶释放百分率。 二、试剂及材料 1. pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液(PBS); 2. 抗TCR单克隆抗体(用PBS配成5μg/ml) 3. BLT底物溶液:临用前配制:500μl20mmol/LN-α-苯氧羰基-L-赖氨酸硫代苯甲酯(BLT)贮存液,500μl 22mmol/L 的5,5二硫对硝基苯甲酸(DTNB)贮存液,500μl1%
噬菌体: M13KE T7宿主细胞 : ER2738 BL21/BLT5403/BLT5615噬菌体释放方式: M13噬菌体溶源性,不裂解宿主菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的,其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯。融合方式:M13噬菌体N端与pIII蛋白融合,不适合克隆cDNA,因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳
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