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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
50
- 供应商:
AbMole
- CAS号:
1440964-89-5
- 规格:
5mg
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文献和实验memoday 最近在做一个信号通路的下游磷酸化水平检测,但是做western没有看到任何条带,包括p-ERK,p85。麻烦各位战友帮我分析一下可能原因吧: 1.293T细胞转染质粒(带外源基因),24h 2.无血清培养18h 3.配体(外源基因是该配体的膜受体)激活,37度,10min 4.PLB(promega公司)裂解细胞,做western,抗体是SANTA CRUZ公司的p-ERK (Tyr 204),以及cell
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
b) 倾斜96孔板,吸干剩余的PBS c) 去离子水将5XPLB稀释成1XPLB,使用前放到常温 d) 每孔加50μL稀释好的 1X PLB,摇床常温条件下摇15min,进行裂解 e) 白色不透光的96孔酶标板中每孔加步骤4的上清液10μL,加入100μL预先混好的LAR II,2s后测数据 f) 每孔添加100μL预先混好的Stop&Glo Reagent,静止2s后,测数据 注意:进行Luciferase活性检测时,需在避光条件
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