- ￥243.20
- 康瑞纳
- 进口/国产
- LC17238
- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
Sealed in dry,2-8°C
- 保质期：
2年
- 英文名：
1,1-Bis(methylthio)-2-nitroethylene
- 库存：
999
- 供应商：
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号：
13623-94-4
- 规格：
25g
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文献和实验【摘要】目的 构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体，并测定该微型双功能抗体的生物学活性。方法 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD20微型双功能抗体，并用双脱氧终止法测定DNA序列；采用亲和层析法纯化该产物，并用Western blot和分子排阻层析鉴定纯化产物；采用免疫荧光法、放射免疫分析法和玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。结果 DNA序列测定结果表明：抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体已构建成功，表达可溶性产物的产量达2mg/l以上，纯化产物中二
taq polymeras.（clontech), 效果好，就是贵了点。 我用的退火温度为60度可见模糊片段，但58度就只有引物二聚体了， 你用高温变性，向95度，5min,后加入taq酶，其余度循环中间用95度，15s，如果TM值高过60，可以考虑用65－62度，增加循环数。 changle 可以用双温法试试，比如35个循环，总变性之后，前五个循环双温即没有延伸，后三十个循环三温，具体温度根据引物Tm值定。我试过效果不错。 mcli 如果基因的5’端含有丰富
越低，重复性越差，应减少样品的稀释倍数。 Q9．变性温度是否合适 大部分的双链DNA在95°C就开始解链了，在有些情况下在90至94°C都不能很好地变性DNA。由于部分变性，参加反应的探针和引物相应的减少了，因此反应效率会下降。 Q10．变性时间是否合适 15到20秒对于变性扩增子是足够了，然而，长一点的产物，可能会需要30秒，60秒的变性时间通常是不需要的。 Q11．退火温度和时间是否合适 检查引物和探针的Tm值
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