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- 文献和实验
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- 保存条件:
咨询
- 保质期:
咨询
- 英文名:
SIGMA
- 库存:
999
- 供应商:
麦格生物
- CAS号:
无
- 规格:
L7261-10MG
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文献和实验用5-10ml 1xNTE(NaCl 100mmol/L ,Tris-HCl 10mmol/l pH7.4,EDTa 1mmol/L pH8.0)调整细胞为2×107 个(组织应切碎置液氮冰冻,高速搅切成粉末后,加入缓冲液)。加1/10-1/20体积(V)10mg/ml蛋白酶(Sigma Ⅷ型),1/20v 10%SDS,37℃2小时。加等量酚/3xNTE(3xNTE上封)混匀(至少7分钟)。4℃,3000rpm,10分钟。取上清液,加2ml TE(Tris-HCl 10mmol/L
Metabolic labeling Immunoprecipitation
/ml Cysteine-HCl,100µg/ml methionine,sterile filtered • Tris-buffered saline (TBS): 20mM Tris,150mM NaCl,pH 7.4 • X1000 Protease inhibitor soln: 500mM PMSF (Sigma P-7626)in EtOH,10mg/ml leupeptin (Sigma L-2023)in water,10mg/ml pepstatin A (P-4265
Metabolic labeling Immunoprecipitation
P-7626) in EtOH, 10mg/ml leupeptin (Sigma L-2023) in water, 10mg/ml pepstatin A (P-4265) in dimethylformamide • IP buffer: 1% Triton x-100, 0.05% NP-40 in TBS • x2 IP buffer: 2% Triton x-100, 0.1% NP-40 in TBS • ProteinG agarose (GIBCO #15920
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