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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
高首鲟虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
50次
产品及特点:
高首鲟虹彩病毒(White Sturgeon Iridovirus,WSIV)会引起高首鲟虹彩病毒病,主要是水平传播,通过水平途径在水体、饵料和鱼体间进行传播和感染,主要危害幼鱼,发病后死亡率高达37.9%。病鱼体色变黑,嗜睡,贫血症状明显;体表和鳃出血,鳃上有瘀斑,呈灰白色;脾脏肥大。病毒对鱼体上皮组织和内皮组织亲嗜性较强,对脾脏、肾脏等鱼类造血器官和组织的破坏尤为严重,从而导致病鱼贫血、多器官衰竭而死亡,因此高首鲟虹彩病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了简单快捷的高首鲟虹彩病毒染料法荧光定量PCR检测试剂盒,
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据高首鲟虹彩病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品由酶联生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) |
| 试剂二 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| 试剂三 | 高首鲟虹彩病毒染料法PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 高首鲟虹彩病毒染料法PCR 阳性对 照(1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(红盖) |
| 试剂五 | DNA 病毒裂解液(试用装) | 15 次(9 mL) |
| 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:
DNA 模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
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文献和实验PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,最好在PCR扩增程序结束
(因为在处理过程中RNA极易降解,建议体系中加入适量RNA酶抑制剂。 实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)实验流程 一、RNA的提取(详见RNA提取及反转录) 不同组织样本的RNA提取适用不同的提取方法,因为Real-Time PCR对RNA样品的质量要求较高,所以,正式实验前要选择一款适合自己样品的提取方法,在实验过程中要防止RNA的降解,保持RNA的完整性。 在总RNA的提取过程中,注意避免mRNA的断裂;取2ug进行RNA的甲醛
出来,荧光急剧减少。3、在聚合延伸过程中,引物退火并形成PCR产物。4、聚合完成后,SYBR Green染料与双链产物结合,定量PCR系统检测到荧光的净增量加大。 SYBR Green I荧光染料能与所有的DNA双链相结合,对DNA模板没有选择性,所以特异性不如TaqMan探针。要想用荧光染料法得到比较好的定量结果,对PCR引物设计的特异性和PCR反应的质量要求就比较高。在此前提下,本法是一种成本低廉的选择。
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