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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
Pyrol
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
552-58-9
- 规格:
20mg
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文献和实验应在58-60℃之间,这非常重要,因为我们的试验一般都使用退火温度为60℃,在这个温度下,5’核酸外切酶的活性最高。 2、引物末端(最后5个核苷酸)不能有超过2个的G和C。 3、将引物尽量接近于探针 d)循环参数 当引物和探针按照上述原则设计好后,循环的参数也就确定了,当经过起始的变性温度后(根据Tag酶要求设定),反应要经过95℃,15-20秒,60℃60秒,对于一些模板,45秒也足够了。数据在退火时检测。 e)怎么优化探针和引物的浓度 对于双探针反应,通过选择探针和引物的浓度
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
化DNA。图1显示MGMT的测定和FANCF测定相比,在该试验使用的引物退火温度(58℃)条件下可更加明确的识别稀释比更低的甲基化标准品。图2显示使用FANCF和MGMT MS-HRM测定法筛查多种细胞株的甲基化状态。图2a显示通过FANCF筛查的九种细胞株中只有卵巢癌细胞株2008存在甲基化,其样本熔解特征曲线与100%的甲基化质控品相似。研究的其它细胞株通过FANCF检测为非甲基化结果。图2b显示通过MGMT检测出乳腺癌细胞株MDA-MB435存在甲基化。该样本的曲线特征再次与100%的甲基化质控
compl compl sim X stab ok Left 418 0 0 0 106 67 195 3 3 0 15 0 0 29 Right 435 0 0 0 0 58 285 13 0 0 3 0 0 76 Pair Stats: considered 2298, unacceptable product size 2291, ok 7 primer3 release 0.9 ----
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