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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
Enoxacin sesquihydrate
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
84294-96-2
- 规格:
100mg
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文献和实验太浓,都必须将样本稀释后再测。2) 同一样本的若干不同稀释浓度,所测出来的最终蛋白质浓度会有差异,通常是以稀释度大者较为准确。方法步骤:1) 每槽先加好50 μL标准品 (#0, #1 … #5) 或未知样本 (X1, X2),以二重复加入96 孔滴定盘中,如图所示。微量滴定盘的使用2) 每槽再加入200 μL Dye-Reagent (d),在全部样本槽加完前,不要中断添加;同时小心避免气泡产生。3) 轻拍滴定盘一侧,使添加的各成份均匀混合,注意Dye-Reagent 密度较大,很容易沉积在下方
顺序是高浓度到低浓度(浓度顺序: 10000, 1000, 100, 10, 1)(图 3)。找到原因后,我们将结果切换到 Plate 设置界面,按照实际加样浓度设置标准品,然后回到 Results 界面,点击 Analyze 重新分析以后,标准曲线就正常了。 图 3. 结合扩增曲线发现,标准品的加样浓度和软件设置的不一致 案例 2:标准曲线不显示 在这个案例中,客户在同一块 96 孔板上检测 2 个 assay(18S-1,18S-2)的扩增效率,18S-1 这个 assay 的标准曲线正常显示
值出现过晚(Ct>38)扩增效率低: 反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。PCR产物太长: 一般采用80-150bp的产物长度。3. 标准曲线线性关系不佳加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。模板中存在抑制物,或模板浓度过高4. 负对照有信号引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物
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