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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
Douglas fir / dihydroquercetin
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
480-18-2
- 规格:
20mg
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
。通过在正常DNA(经过重亚硫酸盐修饰)池中按50%、25%、10%、5%和1%稀释100%的甲基化对照DNA(经过重亚硫酸盐修饰)以创建甲基化标准品。MS-HRM引物按Wojdacz和Hansen描述的方法设计[5]。使用LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在96孔LightCycler®480仪器中执行扩增和熔解反应。 图1:(a)含100%甲基化和非甲基化质控品和50%、25%、10%、5%和1%的甲基化标准品的FANCE MS-HRM测定法。使用“Tm Calling
顺序是高浓度到低浓度(浓度顺序: 10000, 1000, 100, 10, 1)(图 3)。找到原因后,我们将结果切换到 Plate 设置界面,按照实际加样浓度设置标准品,然后回到 Results 界面,点击 Analyze 重新分析以后,标准曲线就正常了。 图 3. 结合扩增曲线发现,标准品的加样浓度和软件设置的不一致 案例 2:标准曲线不显示 在这个案例中,客户在同一块 96 孔板上检测 2 个 assay(18S-1,18S-2)的扩增效率,18S-1 这个 assay 的标准曲线正常显示
%,可以从上面的公式推出相对含量(X01/X02) = 2 -ΔΔCT。假设实验的目标是研究药物处理后0、24、48小时IL-2基因在某种组织中的表达量的变化,所用内对照是18S RNA基因。IL-2和18S RNA的测定结果都是CT值,而没有通过标准曲线测定总RNA的pg数。 16. 每个反应管中可以加入多少种探针? 每个反应管中可以加入的探针数目,取决于仪器、软件、试剂和实验设计等几个方面。 首先是仪器的硬件构成和软件的解析能力。在软件解析能力足够的前提下,全波长检测的定量PCR仪如激光
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