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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
Cas9
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
00-0-0
- 规格:
100ug
产品编号:X8925
产品名称:cas9蛋白
Cas9 蛋白为基因重组表达纯化的产品,基因来源于Streptococcus pyogenes,具有体外结合sgRNA并切割dsDNA的功能。
本产品主要用于CRISPR/Cas9系统体外酶切实验、CRISPR靶点筛选、合成生物学、基因组编辑等。
详细介绍
Cas9 核酸酶 Cas9 蛋白为基因重组表达纯化的产品,基因来源于Streptococcus pyogenes,具有体外结合sgRNA并切割dsDNA的功能。其在PAM(ProtospacerAdjacent Motif)上 NGG 处,靶序列的 3 个碱基内进行切割。PAM 序列的 NGG 必须连在靶点之后,位于与 sgRNA 互补的 DNA 的对链上。
本产品主要用于CRISPR/Cas9系统体外酶切实验、CRISPR靶点筛选、合成生物学、基因组编辑等。
产品说明:
剂型:冻干粉,或溶液
酶活:100U/mg
酶活定义:37℃,30分钟切割1μg 1kB DNA 双链定义为一个活性单位。
基本信息:
来源:微生物重组蛋白
分子量:160kDa(SDS-PAGE检测)
纯度:≥90%(SDS-PAGE检测)
保存条件:在冰上融化后使用,使用过程中尽量保存在冰上,为避免反复冻融,建议分装,冻存。
运输条件:低温
安全提示:本试剂仅用于研发或生产,严禁用于人体实验
注意事项:Cas9 蛋白需要在冰上融化后使用,使用过程中尽量保存在冰上,为避免反复冻融,建议分装。
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
选育新方法。而 CRISPR-Cas9 技术的出现,更是极大推动了微生物基因组编辑准确性和效率的提高。【背景】泓迅科技利用 CRISPR-Cas9 技术编辑酵母菌中的一个 920bp 的 ADE1 基因。ADE1 是腺嘌呤合成相关基因,如果 ADE1 失活,则细胞将会积累红色色素,呈现红色菌落。【方法】1、质粒构建2、sgRNA 活性检测3、挑选活性较高的 sgRNA 进行基因组定点编辑4、利用基因功能变化、表性变化和测序等方法检测基因定点修饰结果。【结论】1、从颜色表型变化得知,酵母菌落变成红色菌落,可知 ADE
方法(有视频),个人认为,自行查资料理解每一个元件的含义和作用,可以帮助更快的补充背景知识。通过将散落的知识点集合起来,最后拼凑成自己的知识地图。那么,为什么看起来好像这些 mRNA 都一样,怎么不只放一条完事了?不是滴。。。还有不一样的 mRNA。在学生信的时候,听到过一个词,「可变剪接」,有了初步印象之后,在这里才算是实实在在看到了,我认真的数了数,mRNA 画了 15 条,TP53 蛋白也画了 15 条。那么我们可以理解为,TP53 有 15 个亚型,当然,每个亚型都有自己的 mRNA。Step










