- ￥100 - 1160
- 康瑞纳
- 进口/国产
- A1973
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期：
3年
- 英文名：
FITC
- 库存：
999
- 供应商：
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号：
3326-32-7
- 规格：
25mg/100mg/1g
| 规格： | 25mg | 产品价格： | ￥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100mg | 产品价格： | ￥320.0 |
| 规格： | 1g | 产品价格： | ￥1160.0 |
异硫青酸荧光素酯 FITC 3326-32-7 异硫青酸荧光素酯 FITC 3326-32-7
产品名称：异硫青酸荧光素酯 FITC 3326-32-7
产品编号：A1973
中文别称 Fluorescein isothiocyanate isomer I；异硫青酸荧光橙红；异硫青酸荧光黄；异硫青酸荧光红
英文别称 FITC
CAS 3326-32-7
分子式 C21H11NO5S
分子量 389.38
储存条件 2-8℃
有效期 2年
级别 Conjugation Grade
溶解性 5mg/ml DMSO
危险代码 R：42/43 S：22-36/37-45
纯度 ≥97%(HPLC)
性状 橘黄色粉末
包装 瓶
规格 50mg
说明：
激发：lmax=495 nm
发射：lmax=525 nm
已经报道了全吸收光谱。异硫qing酸荧光素（FITC）被广泛用于
将荧光标记物附着在胺基的蛋白质vi上。异硫qing酸酯基团与氨基反应
蛋白质中的末端胺和伯胺。它已被用于标记包括抗体在内的蛋白质和凝集素。异构体I在苯环的4个碳上有硫qing酸酯基团，而异构体II有5碳上的硫qing酸盐。这两种异构体在光谱上无法区分，无论是波长还是强烈异构体I更容易以纯形式分离，因此价格较低。这可以解释为什么异构体我更常用于标记。然而，出于许多目的，FITC的混合异构体将是
非常合适。与生物分子结合的几何形状以及由此产生的与洗脱相关的性质然而，在电泳或HPLC条件下，可能需要使用单一的纯异构体。这个
偶联过程简单易行，反应迅速。据报道，在作为产品F1628提供的硅藻土（硅藻土）上吸附FITC会增加将FITC分散在蛋白质溶液中的效率。据报道，硅藻土（异构体I）上的FITC反应非常
与蛋白质结合迅速，速度快得多，以至于抗体滴度可能因游离氨基的过度酰化而损失
小组。
说明
测试FITC在丙.酮中1mg/ml的溶解度和溶液外观。它可溶于无水物5mg/ml的二甲基亚砜（DMSO）。它在水中的溶解度小于0.1 mg/ml，在水中为20 mg/ml在乙醇中，在2-甲氧基.乙醇中的浓度为9 mg/ml。1建议使用有机溶剂作为储备溶液，因为FITC在水中分解。FITC在偶联前在碱性缓冲液中稀释
使用程序
FITC标记蛋白质
1.
制备至少2mg/ml蛋白质在0.1M碳酸钠缓冲液（pH 9）中的溶液。注意：在0-5°C温度下，碳酸氢钠缓冲液的储存时间不得超过1周。
缓冲区可能在存储时发生变化。建议在使用前制作新的缓冲液。待缀合的蛋白质应无污染蛋白质，蛋白质溶液不应在含有叠氮hua钠或胺如Tris或甘氨酸的缓冲液中制备，因为它们抑制
标记反应。如果缓冲液含有胺或叠氮hua钠，则用PBS、pH透析蛋白质溶液7.4，在0-5°C下过夜。避免在高pH值（>8.0-8.5）下透析，因为这可能对一些人有害蛋白质。
2.
将FITC以1mg/ml溶解在无水DMSO中。注：每次标记反应都应新鲜制备。
3.
对于每1 ml蛋白质溶液，在5μL等分试样中缓慢加入50μL FITC溶液，同时轻轻加入并连续搅拌蛋白质溶液。
4.
加入所有所需量的FITC溶液后，在黑暗中孵育反应8小时。
5.
将NH4Cl添加到50mM的最终浓度，并在4°C下孵育2小时。6.将二甲苯qing基加入0.1%，将甘油加入5%。7.通过使用具有排除限制为20000至50000（对于球状蛋白如抗体）。随柱流停止，小心地将反应混合物分层到柱的顶部。然后打开列，允许使反应混合物流入柱中。当它全部进入柱床时，小心地将PBS加入列的顶部，并连接到缓冲电源。柱子上将形成两条带子。移动速度越快结合蛋白带首先洗脱，通常可以在室温下看到。越慢移动带是未反应的（游离的）FITC和二甲苯qing基，并且将仅用随后的PBS洗脱洗涤。8.将缀合物在4°C下储存在避光容器中的柱缓冲液中。可以添加叠氮hua钠作为防腐剂（最终浓度15mM）。如果蛋白质浓度低（<1 mg/ml）
可以将血清白蛋白（BSA）添加到1%的最终浓度。9.产物的荧光素与蛋白质的比率可以通过测量495处的吸光度来估计nm和280nm。F/P比率应介于0.3和1.0之间。较低的比率将产生较低的信号；更高比例将提供高背景。荧光素/蛋白质摩尔比（F/P）的测定。F/P摩尔比率定义为缀合物中FITC的摩尔数与蛋白质的摩尔数的比率。为了确定该比率，需要首先确定缀合物样品在280nm处的吸光度，然后在495nm处。将缀合物样品放入石英试管中。读取缀合物样品在280 nm处的吸光度495nm。的吸光度读数
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文献和实验Ren L, Liu J, Liu C, Yang T, Wu X, Zhang X, Yang L, Xia J, Li W. AIn Vitro Cell（RAW264.7 cells；100 ng/mL LPS，24 h at 37 °C） RAW264.7 cells were seeded in confocal dishes at a density of 1 × 105 cells per dish. After the culture of 24 h, cells were treated with 100 ng/mL LPS in different media, including a control medium, PACDFe extract, and PACDFe hydrogel extract supplemented with 1 μM LL-37 for another 24 h at 1321 °C. 更多文献信息请详询客服
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
FITC荧光二抗？――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光
FITC荧光二抗？――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光 FITC（Fluorescein Isothiocyanate，异硫*酸荧光素）是一种绿色荧光团，在免疫学实验里，经常被用于荧光团标记到相应的检测分子，如抗体上。FITC的纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4，最大吸收光波长为 490～495nm，最大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素
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