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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
ONPG
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
369-07-3
- 规格:
1g/5g
| 规格: | 1g | 产品价格: | ¥80.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5g | 产品价格: | ¥320.0 |
ONPG 邻硝基.苯-β-D-吡.喃半乳糖苷 ONPG 369-07-3 邻硝基.苯-β-D-吡.喃半乳糖苷 ONPG 369-07-3
产品名称:邻硝基.苯-β-D-吡.喃半乳糖苷 ONPG 369-07-3
产品编号:A3400
中文别称 ONPG
英文别称 o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside
CAS 369-07-3
分子式 C12H15NO8
分子量 301.25
储存条件 -20℃
有效期 1年
级别 Ultra Pure Grade
溶解性 10mg/mL in water
纯度 98%
性状 白色粉末
包装 瓶
规格 1g
说明:作为测定β-半乳糖苷酶的底物。经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物,在410-420nm波长可以检测吸光度。
特性: 熔点:186-193℃
溶解性:溶于水,参考浓度1%。
比旋光度:-72--68
用于检测β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)活性,是β-半乳糖苷酶的显色底物。经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物,在410-420nm波长可以检测吸光度。(It is used to detect β-galactosidase (β-galactosidase) activity and is a chromogenic substrate for β-galactosidase. After being catalyzed by β-galactosidase, a yellow product can be produced, and the absorbance can be detected at a wavelength of 410-420 nm.)
该酶对ONPG具有高水解能力(100%),对其天然底物乳糖具有中等活性(25.7%)。然而,酶对所有其他生色硝基.苯类似物的水解能力非常弱,表明Gal308是具有窄底物特异性的β-半乳糖苷酶。为了研究重组酶的动力学参数,测定了GalP8对ONPG和乳糖的Michaelis-Menten常数(Km),转换数(kcat)和催化效率(kcat/Km)。 ONPG的kcat和Km值分别为464.7±7.8s-1和2.7±0.3mM,乳糖分别为264.2±2.1s-1和7.1±0.8mM。 ONPG(172.1 s-1mM-1)酶的kcat/Km值比乳糖(37.2 s-1mM-1)高4.6倍,这清楚地表明Gal308对ONPG的催化效率要高得多而不是乳糖[1]。
在该研究中使用包括ONPG和乳糖的两种底物测量β-半乳糖苷酶活性。通过遵循从ONPG释放的邻硝基.苯酚的量来测量ONPG的β-半乳糖苷酶活性。反应混合物由100μL酶溶液和400μLONPG溶液(2.5g/L,在pH6.8的100mM Tris-HCl缓冲液中)组成。在78℃温育15分钟后,通过加入等体积的1M Na 2 CO 3终止反应。通过在A405测量来定量测定释放的邻硝基.苯酚。一个活性单位定义为在测定条件下每分钟产生1μmol邻硝基.苯酚所需的酶量。比活性表示为每毫克蛋白质的单位。在含有100μL酶溶液和5%乳糖的相同缓冲液中进行对乳糖活性的测定,并通过煮沸10分钟终止反应,并使用葡萄糖氧化酶 - 过氧化物酶测定试剂盒测定葡萄糖浓度。通过测量A492定量测定释放的葡萄糖。一个酶活性单位定义为每分钟释放1μmol葡萄糖所需的活性量[1]。
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文献和实验Ren L, Liu J, Liu C, Yang T, Wu X, Zhang X, Yang L, Xia J, Li W. AIn Vitro Cell(RAW264.7 cells;100 ng/mL LPS,24 h at 37 °C) RAW264.7 cells were seeded in confocal dishes at a density of 1 × 105 cells per dish. After the culture of 24 h, cells were treated with 100 ng/mL LPS in different media, including a control medium, PACDFe extract, and PACDFe hydrogel extract supplemented with 1 μM LL-37 for another 24 h at 1276 °C. 更多文献信息请详询客服
邻硝基苯-β-吡喃半乳糖苷 O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside
缩写为 ONPG。是广泛利用于β -半乳糖苷酶活力测定的底物。水解后可游离出邻硝基酚,由于邻硝基酚在碱性条件下呈黄色( 420毫微米光吸收),所以容易进行比色定量。另外利用这种性质,还可用于分离各种代谢调节突变株。
成分 邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG) 60mg (O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL 1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL 制法 将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧。 试验方法 自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1~3h和24h观察
缓冲液: Na2H2PO4 6.9克 溶于40DW中,用5NNOH调PH7.0,再加水到50毫升,冰箱保存.用前若有结晶可稍加温,溶解后再用. ONPG液: 称取ONPG(邻硝基酚--B--D半乳糖苷)80毫克,溶于15毫升D.W中,再加上缓冲液5毫升,放入冰箱中保存.此液不稳定,如出现黄色即不能用. 鉴别: 脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属. 脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性. 乳球菌,枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性.








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