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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Active Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7757 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 。 |
英文别名:CSF3; G-CSF; Granulocyte Colony Stimulating Factor; Pluripoietin; Filgrastim; Lenograstim
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 。
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:7.3
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 同源盒蛋白Meis1抗体 Anti-MEIS1 WB IHC-P IHC-F IF | CNTN3重组大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 黑色素瘤相关抗原抗体10抗体 Anti-MAGEA10 WB IHC-P IHC-F IF | FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 脑型脂肪酸结合蛋白抗原 |
| 丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体 Anti-MAP3K2 WB IHC-P IHC-F IF | VSIG2重组人 VSIG2 / CTXL 蛋白 (His 标签) Protein |
| G蛋白偶联受体24抗体 Anti-GPR24 WB IHC-P IHC-F IF | CGB7 Protein Human 重组人 CGB7 蛋白 (His 标签) |
| 丝裂原活化蛋白激酶组织蛋白1抗体 Anti-MAPK organizer 1 WB IHC-P IHC-F IF | DDR2 Protein Mouse 重组小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (His 标签) |
| S100钙结合蛋白A10抗体 Anti-S100A10 WB IHC-P IHC-F IF | CD55重组小鼠 CD55 / DAF 蛋白 (His 标签) Protein |
| 精子相关蛋白16抗体 Anti-SPAG16 WB IHC-P IHC-F IF | CST1 Protein Human 重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 (His 标签) |
| 鞘氨醇激酶1抗体 Anti-SPHK1 WB IHC-P IHC-F IF | ERH重组人 ERH / DROER 蛋白 (His 标签) Protein |
| S100A13抗体 Anti-S100A13 WB IHC-P IHC-F IF | LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白 |
| 联会复合体蛋白3抗体 Anti-SCP3 WB IHC-P IHC-F IF | SRGN重组人 Serglycin / SRGN 蛋白 (His 标签) Protein |
| 3号染色体开放阅读框20抗体 Anti-C3orf20 WB IHC-P IHC-F IF | 0脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)重组蛋白 Recombinant Glypican 4 (GPC4) |
| C2CD3蛋白抗体 Anti-C2CD3 WB IHC-P IHC-F IF | HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/barnswallow/HongKong/D10-1161/2010) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) |
| 3号染色体开放阅读框65抗体 Anti-C3orf65 WB IHC-P IHC-F IF | KRAS Protein Human 重组人 K-Ras / K-Ras 蛋白 (His 标签) |
| 3号染色体开放阅读框55抗体 Anti-C3orf55 WB IHC-P IHC-F IF | 大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)活性蛋白IL18R1重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 标签) Protein |
| 3号染色体开放阅读框14抗体 Anti-C3orf14 WB IHC-P IHC-F IF | 防御素β126(DEFβ126)重组蛋白 Recombinant Defensin Beta 126 (DEFb126) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验度表达或者敲除 PD 相关蛋白(如 α-突触核蛋白或 LRRK2)来转化目标细胞从而达到模拟病理现象的效果。 但是该模型的一个主要缺点是需要超生理水平的表达相关蛋白才能显现出致病性,这与实际病理现象不符。除此之外,该模型中的 α-突触核蛋白聚集体并不是细丝状,这点特征也与实际病理现象不同。 4.活体注射 α-突触核蛋白模型 该模型是将特定条件下制作的活性蛋白聚集体(aSyn PFFs)注射到活体中来模拟 PD 病理现象。 StressMarq 的活性 aSyn PFFs 在结构功能上都与路易小体中的主要
移植治疗大量实验性糖尿病。他们将同种大鼠胰岛用海藻酸- 聚赖氨酸- 聚乙烯亚胺包埋后植入链脲霉素诱导的糖尿病大鼠体内,在未用免疫抑制剂的情况下,控制大鼠血糖正常达一年左右。 胶囊化培养的优点是:①可防止细胞在培养过程中受到物理损伤;②活性蛋白不能从囊中自由出入半透膜,从而提高细胞密度和产物含量, 并方便分离纯化处理。缺点是:①微囊制作复杂, 成功率不高;②微囊内死亡的细胞会污染正常产物;③收集产物必须破壁,不能实现生产连续化。 2. 固定化方法的选择 (1) 培养规模。由于各种固定化系统可以获得
化的产品。常见的细胞裂解液有 NP40、Triton X-100、RIPA buffer 等。下表是根据目的蛋白的不同定位选择裂解液的建议。虽然裂解液的使用范围比较广泛,能够满足总蛋白的提取,但是无法做到特异蛋白的提取,特别是遇到低丰度蛋白或者活性蛋白功能分析时,通用型的裂解液存在很大的局限性。 样品类型 裂解液(Sigma-Aldrich) 全细胞 NP-40
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