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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Active Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 兔血管内皮生长因子C(VEGFC)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7754 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 。 |
英文别名:VEGF-C; Flt4-L; VRPL; Vascular Endothelial Growth Factor-Related Protein
物种:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 。
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:8.8
应用:Cell culture; Activity Assays.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 基质金属蛋白酶-17抗体 Anti-MMP-17 WB IHC-P IHC-F IF | HA重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein |
| 基质金属蛋白酶11抗体 Anti-MMP-11 WB IHC-P IHC-F IF | rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子 |
| 基质金属蛋白酶-12抗体 Anti-MMP-12 WB IHC-P IHC-F IF | SERPINF2重组人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 基质金属蛋白酶-15抗体 Anti-MMP-15 WB IHC-P IHC-F IF | CGA Protein Human 重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (His 标签) |
| 基质金属蛋白酶-16抗体 Anti-MMP-16 WB IHC-P IHC-F IF | HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 标签) |
| 血清学定义结肠癌抗原抗体1抗体 Anti-SDCG1 WB IHC-P IHC-F IF | CD59A重组小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 基质细胞衍生因子4抗体 Anti-SDF4 WB IHC-P IHC-F IF | PKM Protein Human 重组人 PKM2 / OIP3 蛋白 (His 标签) |
| 肝癌蛋白剪接变异体蛋白抗体 Anti-SVH WB IHC-P IHC-F IF | DPEP2重组人 DPEP2 / MBD-2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 结肠癌抗原抗体8抗体 Anti-SDCCAG8 WB IHC-P IHC-F IF | THOP1 Protein Mouse 重组小鼠 THOP1 蛋白 (His 标签) |
| T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌SART3抗体 Anti-SART3 WB IHC-P IHC-F IF | EPCAM重组食蟹猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 标签) Protein |
| 20号染色体开放阅读框79抗体 Anti-C20orf79 WB IHC-P IHC-F IF | IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist 0.5mgIL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide 白介素-1受体拮抗剂抗原 |
| 20号染色体开放阅读框24抗体 Anti-C20orf24 WB IHC-P IHC-F IF | PROCR Protein Mouse 重组小鼠 Epcr / PROCR 蛋白 (His 标签) |
| 20号染色体开放阅读框4抗体 Anti-C20orf4 WB IHC-P IHC-F IF | KNG1 Protein Human 重组人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 蛋白 (His 标签) |
| 20号染色体开放阅读框30抗体 Anti-C20orf30 WB IHC-P IHC-F IF | 兔血管内皮生长因子C(VEGFC)活性蛋白DSC2重组人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 20号染色体开放阅读框7抗体 Anti-C20orf7 WB IHC-P IHC-F IF | 0脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)重组蛋白 Recombinant Glypican 4 (GPC4) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验上,成为重组载体。基因敲除是为了使某一基因失去其生理功能,所以一般设计为替换型载体。②.ES 细胞的获得:现在基因敲除一般采用是胚胎干细胞,最常用的是鼠,而兔,猪,鸡等的胚胎干细胞也有使用。常用的鼠的种系是129及其杂合体,因为这类小鼠具有自发突变形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的倾向,是基因敲除的理想实验动物。而其他遗传背景的胚胎干细胞系也逐渐被发展应用。[2,3]③.同源重组:将重组载体通过一定的方式(电穿孔法或显微注射)导入同源的胚胎干细胞(ES cell)中,使外源DNA 与胚胎干细胞基因组中相应部分
>A、C。UAG极少被大肠杆菌利用,相比UAAN和UGAN,UAG表现了有效的终止,但其后的碱基对有效终止的影响力为G>U,A>C。对于哺乳动物,偏爱的终止密码子为UGA,其后的碱基可以对in vivo翻译终止有8倍的影响(A、G>>C、U)。对于UAAN系列,in vivo终止效率可以有70倍的差别,UGAN系列为8倍[10]。如果终止密码子附近序列没有最佳化,可能发生明显增加的翻译通读,因此减少了蛋白表达。例如,在兔网状细胞无细胞翻译系统里,UGAC的翻译通读可以高达10%,而第四个碱基
细胞基因敲除的小鼠模型[1]。直到现在,运用基因同源重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法。 (1)利用同源重组 构建基因敲除动物模型的基本步骤: ①. 基因载体的构建:把目的基因和与细胞内靶基因特异片段同源的DNA 分子都重组到带有标记基因(如neo 基因,TK 基因等)的载体上,成为重组载体。基因敲除是为了使某一基因失去其生理功能,所以一般设计为替换型载体。 ②.ES 细胞的获得:现在基因敲除一般采用是胚胎干细胞,最常用的是鼠,而兔,猪,鸡等的胚胎
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