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- 联祖
- LZ-D7649
- 2025年08月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 英文名：
Active Interferon Gamma (IFNg)
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20度
- 规格：
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
IPTG浓度
有可能，宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到，你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG），一种乳糖类似物，控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期，即当溶液的波长600（OD 600）处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质，最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此，使用高浓度的IPTG（> 1mM）可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度，看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔，你可以在37°C的典型温度下，通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质，但通常情况下，溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C，25°C和18°C下进行诱导。 注意：如果首先在37℃生长，先让培养物冷却到诱导温度，再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间，每隔几个小时取样，并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化：对于37℃，尝试4小时;对于30℃，进行5-6小时，并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 豚鼠干扰素γ(IFNg)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7649 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Cavia (Guinea pig ，豚鼠) 。 |
英文别名：IFN-G; IFG; IFI; INFr; IFN, Immune Interferon
物种：Cavia (Guinea pig ，豚鼠) 。
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 90%
等电点：9.7
应用：Cell culture; Activity Assays.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析：
（一）原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案，为客户提供优质服务。
（二）酵母表达系统
酵母是一种真核微生物，其细胞有表达外源蛋白的能力，可以达到一个相当高的胞密度状态，在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰，如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性，当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时，它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验，能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
（三）昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白，在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中，外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞，含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品，免费对客户提供的基因进行序列分析，据Sf9，Sf21，Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性，免费为您进行密码子优化，从而有效提高重组蛋白表达量。
（四）哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时，哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉（Hela）细胞、人胚肾细胞（HEK293）和中国仓鼠卵巢细胞（CHO）。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系，包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系，配合卡梅德设计的高表达载体（含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列），能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 胰岛素受体底物-4抗体 Anti-IRS-4 WB IHC-P IHC-F IF | EPHB1重组小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 胰岛素受体底物-3抗体 Anti-IRS-3 WB IHC-P IHC-F IF | AAT(Alpha-1Anti-tiypsin 0.5mgAAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗胰蛋白酶(抗原) |
| 胰岛素受体底物p53蛋白抗体 Anti-BAIAP2 WB IHC-P IHC-F IF | CLEC10A重组人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 胰岛素受体底物-1抗体 Anti-IRS1 WB IHC-P IHC-F IF | CD28 Protein Human 重组人 CD28 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) |
| 胰岛素受体底物-2抗体 Anti-IRS-2 WB IHC-P IHC-F IF | IL20RB Protein Rat 重组大鼠 IL20RB 蛋白 (His 标签) |
| 转录辅助因子退变样蛋白2抗体 Anti-VGLL2 WB IHC-P IHC-F IF | CLEC4D重组大鼠 CLEC4D / CLECSF8 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 癌基因VAV2抗体 Anti-VAV2 WB IHC-P IHC-F IF | LRP10 Protein Human 重组人 LRP10 蛋白 (Fc 标签) |
| 囊泡相关膜蛋白相关的蛋白B Anti-VAPB WB IHC-P IHC-F IF | MAP2K6重组人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 极低密度脂蛋白受体抗体 Anti-VLDL Receptor WB IHC-P IHC-F IF | FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签) |
| 神经视锥蛋白样1抗体 Anti-VILIP1 WB IHC-P IHC-F IF | DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 嗜乳脂蛋白样3抗体 Anti-BTNL3 WB IHC-P IHC-F IF | Cygb (cytoglobin 0.5mgCygb (cytoglobin) 细胞球蛋白抗原 |
| BOLA1蛋白抗体 Anti-BOLA1 WB IHC-P IHC-F IF | FGFRL1 Protein Mouse 重组小鼠 FGFRL1 / FGFR5 蛋白 (His 标签) |
| 杀菌通透性增加蛋白样1抗体 Anti-BPIL1 WB IHC-P IHC-F IF | IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 标签) |
| BOLA2蛋白抗体 Anti-BOLA2 WB IHC-P IHC-F IF | 豚鼠干扰素γ(IFNg)活性蛋白AHSP重组人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein |
| 杀菌/通透性增加蛋白样2抗体 Anti-BPIL2 WB IHC-P IHC-F IF | A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型猪流感病毒H1N1-M2蛋白 |
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文献和实验上样，最后洗脱出71±15%的活性蛋白质。随后，Batas[12]等人利用SEC 复性了hen egg-white lysozyme 和bovine carbonic anhydrase， 分别获得较好的活性及质量收率。另外，卷曲的DEAE-cellulose 放入层析柱内，类似凝胶过滤层析可以复性蛋白质[13] 。两个重要的因素影响凝胶过滤层析复性蛋白质的收率[14]： 第一个是变性条件下蛋白质的上样，第二个是复性缓冲液中蛋白质结构的变化。Fahey 等人[15,16] 考察了层析介质对复性效率的影响
Tris-HCl, pH 8.0 平衡上样，NaCl 浓度梯度洗脱，获得了“天然”状态的活性蛋白质。 在IEC 中，变性剂的浓度梯度并不能每次都获得高的活性回收，例如α乳白蛋白的收率只有10% 左右。原因可能是折叠的中间体很难从层析介质上洗脱出来。为了避免折叠中间体在层析介质上的堆积，我们发展了两种缓冲液系统的复性方法[26] 。溶解的蛋白质吸附在高浓度变性剂缓冲液平衡的层析柱上，梯度降低变性剂的浓度，同时梯度增加盐离子的浓度，这样可以使蛋白质自发折叠的同时，离开原先吸附的位点，向柱下端移动
目加大用量，并应迅速将标记多肽、蛋白质从反应液中分离出来，以尽量减少多肽、蛋白质活性的损伤。 某些蛋白质或多肽对氯胺T较敏感，还可进一步减少氯胺T用量、缩短碘化反应时间、降低反应温度，以保护蛋白质的活性。这对一些较容易丧失活性蛋白质或多肽的碘标记十分重要。 （4）碘化反应体积：系指加入Na2 S2 O5 终止反应前液体的总量。碘化反应体积愈小，局部反应物浓度愈高，所得碘利用率和标记多肽、蛋白比放射强度就愈高。所以，标记应采用比放射标记效果。当反应液量少（0.5～1.0ml）时
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