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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
Active VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
| 产品名称 | 人VEGF共调节趋化因子1(VCC1)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7563 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) 。 |
英文别名:CXCL17; SCYB17; DMC; Chemokine C-X-C-Motif Ligand 7; Dendritic cell and monocyte chemokine-like protein
物种:Homo sapiens (Human,人) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:-
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 组织胺H4受体抗体 Anti-HRH4 WB IHC-P IHC-F IF | OLR1重组大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 热休克蛋白家族40抗体 Anti-HSP40 homolog WB IHC-P IHC-F IF | EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗原 |
| 糖蛋白P43抗体 Anti-RBMX WB IHC-P IHC-F IF | SRPK3重组人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 滋养层细胞抗原抗体3β7抗体 Anti-HSD3B7 WB IHC-P IHC-F IF | CANT1 Protein Human 重组人 CANT1 蛋白 (His 标签) |
| 热休克蛋白-22抗体 Anti-HSP22 WB IHC-P IHC-F IF | CRP Protein Mouse 重组小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白 (His 标签) |
| 选择性胸腺细胞相关蛋白抗体 Anti-THEMIS WB IHC-P IHC-F IF | CST7重组人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein |
| 跨膜蛋白超家族9-1抗体 Anti-TM9SF1 WB IHC-P IHC-F IF | USP7 Protein Human 重组人 USP7 / HAUSP 蛋白 (aa 208-560) |
| 肿瘤坏死因子配体超家族成员7抗体 Anti-CD70 WB IHC-P IHC-F IF | MAGOH重组人 MAGOH 蛋白 (His 标签) Protein |
| 结构蛋白家族3抗体 Anti-TCTN3 WB IHC-P IHC-F IF | SFTPD Protein Mouse 重组小鼠 SFTPD / SP-D / SFTP4 蛋白 (His 标签) |
| T淋巴细胞受体α抗体 Anti-TCR alpha WB IHC-P IHC-F IF | ANPEP重组小鼠 ANPEP / APN / CD13 蛋白 (His 标签) Protein |
| 磷酸化自噬相关蛋白7抗体 Anti-phospho-ATG7 WB IHC-P IHC-F IF | 嵌套蛋白(NES)重组蛋白 Recombinant Nestin (NES) |
| 锚蛋白重复结构域蛋白42抗体 Anti-ANKRD42 WB IHC-P IHC-F IF | HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| 腺病毒5结合蛋白BS69抗体 Anti-Adenovirus 5 E1A binding protein WB IHC-P IHC-F IF | IFNA2 Protein Human 重组人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白 |
| 胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体 Anti-Anillin WB IHC-P IHC-F IF | 人VEGF共调节趋化因子1(VCC1)活性蛋白TERF1重组人 TERF1 / TRF1 蛋白 (His 标签) Protein |
| 自噬相关蛋白16A抗体 Anti-ATG16L WB IHC-P IHC-F IF | TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53诱导糖酵解和凋亡调节因子蛋白(抗原) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括: ■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶(Ermolova 2003)——目标蛋白切除标签后用BDA(蓝色葡聚糖)亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。 ■ Xklp3a,Tep3Ag和E8R(De Marco 2004)——用蛋白酶切割后,His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除
细胞因子简介 细胞因子(Cytokine,CK)是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的天然活性蛋白质,可以有效促进免疫细胞(如DC细胞,CIK细胞等)、干细胞的体外生长。根据细胞因子主要的功能可分为以下几类: 1,白细胞介素(Interleukin,IL)由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用。 2,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF)根据不同细胞因子刺激造血
很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择,现系统地解答一下,供新手借鉴。
的 pET 系统不断扩大,提供了用于表达的新技术和选择,目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点 · 是原核蛋白表达引用最多的系统 · 在任何大肠杆菌表达系统中,基础表达水平最低 · 真正的调节表达水平的“变阻器”控制 · 提供各种不同融合标签和表达系统配置 · 可溶性蛋白生产、二硫键形成、蛋白外运和多肽生产等专用载体和宿主菌 · 许多载体以 LIC 载体试剂盒提供,用于迅速定向克隆 PCR 产物 · 许多宿主
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