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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 英文名:
Active Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 小鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7547 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) 。 |
英文别名:CSF3; G-CSF; Granulocyte Colony Stimulating Factor; Pluripoietin; Filgrastim; Lenograstim
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:-
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 组蛋白去乙酰化酶3抗体 Anti-HDAC3/HD3 WB IHC-P IHC-F IF | NCKIPSD重组人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 标签) Protein |
| 5’-三磷酸聚核苷酸抗体 Anti-HCE WB IHC-P IHC-F IF | Skp2 peptide 细胞S相激酶相关蛋白抗原 0.5mgSkp2 peptide 细胞S相激酶相关蛋白抗原 |
| 组氨酸三聚体核苷结合蛋白1抗体 Anti-HINT1 WB IHC-P IHC-F IF | TRIB2重组人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 甲状腺促进激素alpha链 Anti-hCG alpha 4 WB IHC-P IHC-F IF | CALCA Protein Human 重组人 CALCA / CGRP 蛋白 (Fc 标签) |
| A型流感病毒H7N9凝集素抗体 Anti-H7N9 NA WB IHC-P IHC-F IF | LTA4H Protein Human 重组人 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 标签) |
| TIP30蛋白抗体 Anti-TIP30 WB IHC-P IHC-F IF | CTSL1重组小鼠 Cathepsin L / CTSL 蛋白 (His 标签) Protein |
| 干燥综合征相关蛋白2抗体 Anti-TROVE-2 WB IHC-P IHC-F IF | S100A8 Protein Human 重组人 S100A8 / CAGA 蛋白 (His 标签) |
| 甲状腺激素受体相互作用蛋白4抗体 Anti-TRIP4 WB IHC-P IHC-F IF | VTCN1重组人 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| β-taxilin蛋白抗体 Anti-TXLNB WB IHC-P IHC-F IF | NP Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP (His 标签) |
| 转录因子E2F二聚体蛋白2抗体 Anti-TFDP2 WB IHC-P IHC-F IF | CPE重组人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 去整合素样金属蛋白酶28抗体 Anti-ADAM28 WB IHC-P IHC-F IF | 内皮脂肪酶(LIPG)重组蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG) |
| 整合素样金属蛋白酶与凝血酶样2蛋白抗体 Anti-ADAMTSL2 WB IHC-P IHC-F IF | NP Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP (His 标签) |
| 去整合素样金属蛋白酶20抗体 Anti-ADAM20 WB IHC-P IHC-F IF | ICAM2 Protein Human 重组人 ICAM-2 / CD102 蛋白 (His 标签) |
| 整合素样金属蛋白酶与凝血酶样3蛋白抗体 Anti-ADAMTSL3 WB IHC-P IHC-F IF | 小鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)活性蛋白CCL18重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 标签) Protein |
| 去整合素样金属蛋白酶23抗体 Anti-ADAM23 WB IHC-P IHC-F IF | 上皮中性粒细胞激活肽78(ENA78)重组蛋白 Recombinant Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78) |
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文献和实验的模拟人类发病的真实情况,导致没法研究早期疾病阶段。 2.基因改造小鼠模型 该模型是遗传型 PD 被发现后出现的一种模型,它显示出来的病理特征更接近于遗传型 PD。 而且该模型在研究疾病信号通路,疾病早期特征以及研发遗传型 PD 治疗干预手段方面有重要的意义。不过该模型并不被认为是最好的 PD 模型,因为它缺少强烈的黑变性特征,也就是疾病后期的运动损伤特征。 3.病毒载体转基因模型 该模型是近期出现的可以模拟两种疾病特征(前期路易小体病理现象和后期黑变性运动缺陷)的模型。该模型通过过
性抗体,其筛选周期短,操作简单,应用范围广,可获得人源化抗体。 普健生物噬菌体展示抗体库技术平台 1.丰富的噬菌体抗体技术经验,5年以上噬菌体抗体开发,交付上百个噬菌体展示抗体开发项目 2.具有全人源重组抗体库,库容高达千亿级别(10∧11pfu),两步建库法,保证了文库的多样性,抗体库片段插入正确率高;可以两周拿到全人源重组抗体 3.可以构建多物种(人源、小鼠、兔子、羊驼、鸡、狗、猴等)抗体文库 4.可以构建多种类型(scfv、Fab、VHH 等)的抗体
(2)建立鼠系,将带有外源基因的小鼠与未经转基因的小鼠交配、传代后,后代有50%概率带有整合的基因供实验用。也可将合适的组织进行细胞培养,建立细胞系。 (3)自小鼠内脏提取RNA,与目的基因探针做分子杂交,以鉴定外源基因的表达和表达的组织特异性。表达产物可以测定活性的,也可直接自血液或组织测定活性蛋白质,常用的方法如酶联免疫吸附试验(ELISA)或放射免疫测定(RIA)等。亦可取胚胎进行分析。
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