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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Active Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 人血管内皮生长因子D(VEGFD)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7537 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) 。 |
英文别名:FIGF; VEGF-D; C-Fos Induced Growth Factor
物种:Homo sapiens (Human,人) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:-
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 艾滋病病毒抗体 Anti-HIV1 p55+p24+p17 WB IHC-P IHC-F IF | NGFR重组小鼠 NGFR / P75 蛋白 (His 标签) Protein |
| 跨膜蛋白酶丝氨酸1抗体 Anti-Hepsin WB IHC-P IHC-F IF | 白介素12B(IL12B)重组蛋白 Recombinant Interleukin 12B (IL12B) |
| 肺癌癌基因蛋白3抗体 Anti-HLC3 WB IHC-P IHC-F IF | UBASH3B重组人 UBASH3B / Sts1 / TULA-2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 高密度脂蛋白抗体 Anti-High density lipoprotein WB IHC-P IHC-F IF | CA4 Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 (His 标签) |
| 蛋白激酶底物相关蛋白抗体 Anti-HEF1 WB IHC-P IHC-F IF | PTGFRN Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 蛋白 (His 标签) |
| 转录因子THOC2抗体 Anti-THOC2 WB IHC-P IHC-F IF | CXADR重组小鼠 CXADR 蛋白 (His & Fc 标签) Protein |
| 抑癌蛋白TCHP抗体 Anti-TCHP WB IHC-P IHC-F IF | KIR2DL1 Protein Human 重组人 KIR2DL1 / CD158a 蛋白 (Fc 标签) |
| T细胞急性淋巴细胞性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗体 Anti-Tal1 WB IHC-P IHC-F IF | TLE3重组人 TLE3 蛋白 (aa 484-772, GST 标签) Protein |
| 胚胎干细胞相关蛋白TXNDC9抗体 Anti-TXNDC9 WB IHC-P IHC-F IF | CD160 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD160 蛋白 (Fc 标签) |
| 转录因子9抗体 Anti-TCF9 WB IHC-P IHC-F IF | IL6ST重组小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) Protein |
| 小肠通道蛋白5抗体 Anti-ACCN5 WB IHC-P IHC-F IF | 骨成型蛋白2(BMP2)重组蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) |
| p53诱导蛋白5抗体 Anti-ANO9 WB IHC-P IHC-F IF | TGFB2 Protein Canine 重组狗 TGFB2 / TGF-beta 2 蛋白 (His 标签) |
| 脑通道蛋白2抗体 Anti-ACCN2 WB IHC-P IHC-F IF | HSF1 Protein Human 重组人 HSF1 / HSTF1 蛋白 (His 标签) |
| 锚蛋白重复域5抗体 Anti-ANKRD5 WB IHC-P IHC-F IF | 人血管内皮生长因子D(VEGFD)活性蛋白SRFBP1重组人 SRFBP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 脑通道蛋白4抗体 Anti-ACCN4 WB IHC-P IHC-F IF | Apelin 脂肪炎症因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪炎症因子Apelin抗原 |
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文献和实验., Satomi, Y., Kurata, T., Ueno, N.,Norioka, S., Kondoh, H., et al. (2006)Monounsaturated fatty acid modificationof Wnt protein: its role in Wnt secretion. Dev Cell , 11 , 791-801. 3. Willert, K., Brown, J. D., Danenberg, E., Duncan, A. W., Weissman, I. L
的成功至少部分地是由于其与大肠杆菌分子伴侣系统相互作用的结果。 参考文献 Cabrita, L.D., et al. 2006. BMC Biotechnol
度表达或者敲除 PD 相关蛋白(如 α-突触核蛋白或 LRRK2)来转化目标细胞从而达到模拟病理现象的效果。 但是该模型的一个主要缺点是需要超生理水平的表达相关蛋白才能显现出致病性,这与实际病理现象不符。除此之外,该模型中的 α-突触核蛋白聚集体并不是细丝状,这点特征也与实际病理现象不同。 4.活体注射 α-突触核蛋白模型 该模型是将特定条件下制作的活性蛋白聚集体(aSyn PFFs)注射到活体中来模拟 PD 病理现象。 StressMarq 的活性 aSyn PFFs 在结构功能上都与路易小体中的主要
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