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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
34
- 英文名:
Active Interleukin 35 (IL35)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 人白介素35(IL35)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7480 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) 。 |
英文别名:
物种:Homo sapiens (Human,人) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:8.7
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| G蛋白偶合受体激酶1抗体 Anti-GRK1 WB IHC-P IHC-F IF | FCGR4重组小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His 标签) Protein |
| 糖调节蛋白94抗体 Anti-GRP94 WB IHC-P IHC-F IF | Cdc34 peptide 细胞周期调控因子34抗原 0.5mgCdc34 peptide 细胞周期调控因子34抗原 |
| 三磷酸鸟苷环水解酶抗体 Anti-GTP cyclohydrolase 1 WB IHC-P IHC-F IF | ADK重组人 ADK 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 促代谢型谷氨酸受体5抗体 Anti-mGluR5 WB IHC-P IHC-F IF | BCL6 Protein Human 重组人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 标签) |
| 生长调节致癌基因-1抗体GROa Anti-GRO Alpha WB IHC-P IHC-F IF | SELL Protein Mouse 重组小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 标签) |
| 腺肿瘤,仅供科研 | TIGIT Protein Mouse 重组小鼠 TIGIT / VSTM3 蛋白 (His 标签) |
| 声带,仅供科研 | JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1 0.5mgJAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗原 |
| 升主动脉,仅供科研 | EDA2R重组食蟹猴 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 肾脏肿瘤,仅供科研 | HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| 腺肿瘤组织芯片,仅供科研 | FGFR4重组人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体 Anti-ARMCX2 WB IHC-P IHC-F IF | SERPINA6重组人 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 标签) Protein |
| 肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体 Anti-ABI2 WB IHC-P IHC-F IF | TSPAN1 Protein Human 重组人 TSPAN1 蛋白 (aa 110-211, Fc 标签) |
| ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体 Anti-ARMCX3 WB IHC-P IHC-F IF | GPD1 Protein Human 重组人 GPD1 / Glycerolphosphate Dehydrogenase 1 蛋白 (His 标签) |
| ADP核糖基化因子样11抗体 Anti-ARL11 WB IHC-P IHC-F IF | 人白介素35(IL35)活性蛋白CALCA重组人 CALCA / CGRP 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体 Anti-ARMCX1 WB IHC-P IHC-F IF | Nogo-66 1-40 Nogo-66 (1-40 0.5mgNogo-66 1-40 Nogo-66 (1-40) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验。 ■ 蚯蚓血红蛋白(Karlsen 2005)——酶切后,用分子筛分离纯化蚯蚓血红蛋白,纯化后的蛋白通过圆二色谱检测得到的α-螺旋结构与模型预期结果一致,且纯化后的蛋白可以以单体的形式稳定保存。 ■ 人白介素-29(Li 2006)——用S-蛋白亲和层析比Ni2+亲和层析可以得到更纯的目的蛋白。将融合蛋白N端的NusA/His•Tag®/S•Tag™标签切掉后,用链亲和素琼脂去除生物素标记的凝血酶。用水疱性口膜炎病毒(VSV)处理固定的人羊膜上皮细胞(WISH 细胞)后,通过检测纯化
用于其自身和其他caspase酶原,由此形成有caspase介导的信号转导级联反应(caspasecascade)。 Caspase在天冬氨酸(Asp)部位被切断后从酶原转换成活性蛋白酶 Caspase主要行使两类功能:诱导凋亡和参与炎症反应。目前已知caspase 2、caspase 3、caspase 6、caspase 7、caspase 8、caspase 9和caspasel0参与凋亡信号传导,而caspasel和caspase 11(可能还有caspase 4和caspase 5)主要参与
pH值,为大多数蛋白的分离和转移提供优良的性能。现在可以获得8个分离范围,分离绝大多数不同大小的蛋白。Novex® Tris-Glycine Gels基于传统的Laemmli buffer system,可能被使用在所有鞍椎姆掷搿Mü齀nvitrogen公司可以获得12种不同百分比浓度和加样孔大小的凝胶。Novex® Tricine Gels是分离肽和低分子量蛋白的理想凝胶。Novex® Zymogram Gels使用gelatin或者casein作为底物分离活性蛋白酶,可以鉴定蛋白酶的大小和活性
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