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- 联祖
- LZ-D7466
- 2025年07月22日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
Active Interferon Alpha 16 (IFNa16)
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20度
- 规格：
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能，宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到，你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG），一种乳糖类似物，控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期，即当溶液的波长600（OD 600）处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质，最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此，使用高浓度的IPTG（> 1mM）可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度，看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔，你可以在37°C的典型温度下，通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质，但通常情况下，溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C，25°C和18°C下进行诱导。 注意：如果首先在37℃生长，先让培养物冷却到诱导温度，再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间，每隔几个小时取样，并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化：对于37℃，尝试4小时;对于30℃，进行5-6小时，并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 人干扰素α16(IFNa16)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7466 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human，人) 。 |
英文别名：Interferon alpha-WA
物种：Homo sapiens (Human，人) 。
缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性状：冻干粉
纯度：> 90%
等电点：-
应用：Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析：
（一）原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案，为客户提供优质服务。
（二）酵母表达系统
酵母是一种真核微生物，其细胞有表达外源蛋白的能力，可以达到一个相当高的胞密度状态，在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰，如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性，当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时，它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验，能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
（三）昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白，在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中，外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞，含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品，免费对客户提供的基因进行序列分析，据Sf9，Sf21，Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性，免费为您进行密码子优化，从而有效提高重组蛋白表达量。
（四）哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时，哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉（Hela）细胞、人胚肾细胞（HEK293）和中国仓鼠卵巢细胞（CHO）。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系，包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系，配合卡梅德设计的高表达载体（含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列），能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| Ras GTP酶活化蛋白结合蛋白1抗体 Anti-G3BP1 WB IHC-P IHC-F IF | ERBB2重组食蟹猴 HER2 / ErbB2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1 Anti-phospho-GIT1 WB IHC-P IHC-F IF | IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3 0.5mgIGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term 胰岛素样生长因子结合蛋白-3抗原 |
| 糖激酶调节蛋白抗体 Anti-GKRP WB IHC-P IHC-F IF | MAP2K2重组人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 蛋白 (GST 标签) Protein |
| GTP结合蛋白10抗体 Anti-GTPBP10 WB IHC-P IHC-F IF | B3GNT6 Protein Human 重组人 B3GNT6 蛋白 (aa 44-384, His 标签) |
| 磷酸化Ras GTP酶活化蛋白结合蛋白1抗体 Anti-phospho-G3BP1 WB IHC-P IHC-F IF | KLRB1A Protein Mouse 重组小鼠 NKR-P1A / Klrb1a 蛋白 (His 标签) |
| 胰体，仅供科研 | PDGFRB Protein Rat 重组大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白 (His 标签) |
| 胰腺癌组织芯片，仅供科研 | AQP5(aquaporin Protein-5 0.5mgAQP5(aquaporin Protein-5) 水通道蛋白-5抗原 |
| 胰腺，仅供科研 | EFNA4重组小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 标签) Protein |
| 胰尾，仅供科研 | IGFBP3 Protein Human 重组人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 标签) |
| 胰头，仅供科研 | HA重组甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein |
| 激活素受体2B抗体 Anti-ARIP2B WB IHC-P IHC-F IF | PDGFC重组人 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (His 标签) Protein |
| 软骨蛋白聚糖抗体 Anti-Aggrecan1 WB IHC-P IHC-F IF | OMG Protein Human 重组人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-416, His 标签) |
| p53凋亡刺激蛋白1抗体 Anti-ASPP1 WB IHC-P IHC-F IF | GMPR Protein Human 重组人 GMPR / GMPR1 蛋白 (His 标签) |
| 5-氨基乙酰合酶1抗体 Anti-ALAS-E WB IHC-P IHC-F IF | 人干扰素α16(IFNa16)活性蛋白IL17RA重组人 IL17RA / CD217 蛋白 (His 标签) Protein |
| P53凋亡刺激蛋白2抗体 Anti-ASPP2 WB IHC-P IHC-F IF | NADPH peptide 还原型辅酶Ⅱ抗原 0.5mgNADPH peptide 还原型辅酶Ⅱ抗原 |
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文献和实验的选择。Kohl等（2008）也发现只要在20-25℃诱导表达，NusA标签能够大大提高难表达的蛋白比如膜蛋白的可溶性。与Korf等的研究结果一致，Kohl等也发现25℃诱导表达比30℃或37℃诱导表达可以纯化得到更多的NusA融合蛋白。 切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白 表2总结了16个采用NusA标签成功获得可溶性蛋白，在切除标签后这些蛋白仍有正确折叠结构和活性。大部分这种研究是是关于分子量小于或接近20kDa的目标蛋白。纯化
结构虽然由其氨基酸顺序决定，然而伸展肽链折叠为天然活性结构的过程还受到周围环境的影响。 为了有的放矢地开发辅助蛋白质复性的技术，研究工作者纷纷开展了对蛋白质折叠机制的探讨。目前有两种不同的假设：一种假设认为，肽链中的局部肽段先形成一些构象单元，如α螺旋、β折叠、β转角等二级结构，然后再由二级结构单元的组合、排列，形成蛋白质三级结构；另一种假设认为，首先是由肽链内部的疏水相互作用导致一个塌陷过程，然后经逐步调整，形成不同层次的结构。尽管是不同的假设，但很多学者都认为有一个所谓‘熔球态’的中间
上样，最后洗脱出71±15%的活性蛋白质。随后，Batas[12]等人利用SEC 复性了hen egg-white lysozyme 和bovine carbonic anhydrase， 分别获得较好的活性及质量收率。另外，卷曲的DEAE-cellulose 放入层析柱内，类似凝胶过滤层析可以复性蛋白质[13] 。两个重要的因素影响凝胶过滤层析复性蛋白质的收率[14]： 第一个是变性条件下蛋白质的上样，第二个是复性缓冲液中蛋白质结构的变化。Fahey 等人[15,16] 考察了层析介质对复性效率的影响
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