- ￥3490
- mlBio/酶联生物
- mlE11772
- 国内
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
禽白血病病毒E亚群染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光低温保存
- 规格：
50次
产品及特点：
1. 一站式，用于不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据禽白血病病毒E亚群的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 基于染料法 qRT-PCR 检测，灵敏度比常规 RT-PCR 高 10-100 倍，可以达到至少 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 qRT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 30μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品由酶联生物提供，不得用于临床诊断。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qRT-PCR 缓冲液 | 500 μL（棕色管） |
| 试剂二 | 10×qRT-PCR 酶混合液 | 100 μL（红盖） |
| 试剂三 | ROX 染料 I，50× | 20 μL（棕色管） |
| 试剂四 | ROX 染料 II，50× | 20 μL（棕色管） |
| 试剂五 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL（黄盖） |
| 试剂六 | 禽白血病病毒E亚群染料法 qRT-PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂七 | 禽白血病病毒E亚群染料法 qRT-PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂八 | 沙核酸释放剂（试用装） | 20 次（1mL，绿盖） |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存，有效期一年。
阳性对照需要因易污染其他成分需要单独放置。本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供 DNA 片段作为阳性对照。
自备试剂：
样品 RNA。
四、数据处理：
如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA浓度的 log 值，再推算出其浓度。禽白血病病毒E亚群染料法荧光定量RT-PCR试剂盒现货供应用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 40，则为阳性。
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文献和实验或者 Ct 值偏大的样本孔，到底是真的没有要检测的对象，还是扩增有问题，亦或是提取中的问题？为了发现这种假阴性的发生，合理的阳性对照可以监控实验的不同步骤： 扩增对照 Amplification Control 可使用含有扩增片段的质粒、假病毒或者基因组 DNA/cDNA 作为扩增阳性对照，监控荧光定量 PCR 的体系是否正常，包括酶、引物、探针等。如果检测中包含多个目标片段，可以将这些目标片段都克隆到同一个质粒中，方便制备和使用。当扩增对照没有扩增，或者 Ct 值大于预期，则说明定量 PCR
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
由于 Real-time qPCR 的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项常规技术。越来越多的研究文章中涉及 RT-PCR 的实验，也基本上被 real-time qPCR 所代替。由于 real-time aPCR 输出的数据不同于常规的 PCR 电泳检测，很多没有做过 real-time qPCR 的研究者常常感到高深莫测，不知从何入手；甚至一些做过次实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑，不知所措。 本文就从 real-time qPCR 的发展史说起，包括 real
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
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