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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
肠道病毒A组染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 一站式,用于不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2. 根据肠道病毒A组的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3. 基于染料法 qRT-PCR 检测,灵敏度比常规 RT-PCR 高 10-100 倍,可以达到至少 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 qRT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 30μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品由酶联生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qRT-PCR 缓冲液 | 500 μL(棕色管) |
| 试剂二 | 10×qRT-PCR 酶混合液 | 100 μL(红盖) |
| 试剂三 | ROX 染料 I,50× | 20 μL(棕色管) |
| 试剂四 | ROX 染料 II,50× | 20 μL(棕色管) |
| 试剂五 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL(黄盖) |
| 试剂六 | 肠道病毒A型染料法 qRT-PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂七 | 肠道病毒A型染料法 qRT-PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂八 | 沙核酸释放剂(试用装) | 20 次(1mL,绿盖) |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
阳性对照需要因易污染其他成分需要单独放置。本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供 DNA 片段作为阳性对照。
自备试剂:
样品 RNA。
四、数据处理:
如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA浓度的 log 值,再推算出其浓度。肠道病毒A组染料法荧光定量RT-PCR试剂盒现货供应用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性,如果小于 40,则为阳性。
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文献和实验Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
由于 Real-time qPCR 的众多优点,现在已经是生命科学领域的一项常规技术。越来越多的研究文章中涉及 RT-PCR 的实验,也基本上被 real-time qPCR 所代替。由于 real-time aPCR 输出的数据不同于常规的 PCR 电泳检测,很多没有做过 real-time qPCR 的研究者常常感到高深莫测,不知从何入手;甚至一些做过次实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑,不知所措。 本文就从 real-time qPCR 的发展史说起,包括 real
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
,不靠壁,不贴液面。 混匀平均分装的注意事项: 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下,以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀,不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) (FQ
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