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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 英文名:
Sporothrix schenckii
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
产品名称:申克孢子细菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Sporothrix schenckii
产品规格:50T
保存及有效期:请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:样品模板
产品特点:
1. 一站式,用户不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。
申克孢子细菌探针法荧光定量PCR试剂盒包装规格及成分(具体信息详见说明/书):
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 说明/书 |
使用手册 | 1 份 |
申克孢子细菌探针法荧光定量PCR试剂盒注意事项:
1.所有操作严格按照说明/书进行;
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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Real Time PCR法是实时监测解析PCR扩增量的方法。因其无需电泳,大大减低了实验污染的机率,且具有快速、可对检测靶基因定量而倍受青睐。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞、细菌等mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果。 一、荧光定量技术需要的配套设备 1、荧光定量PCR仪 ABI 7900荧光定量PCR仪 Lightcycler
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程











