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量大从优,欢迎询价
- 英文名:
/
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/
- 保质期:
12个月
- 供应商:
李记生物Life-iLab
- 保存条件:
4℃
- 规格:
50mL/500mL
| 规格: | 50mL | 产品价格: | ¥48.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500mL | 产品价格: | ¥158.0 |
快速封闭液(即用型,免洗)
产品描述
快速封闭液(即用型,免洗)(以下简称“快封液”)是一款无蛋白成分快速 Western Blot 的封闭液, 可用于高效快速的封闭转膜后的 NC 或 PVDF 膜,可替代脱脂奶粉、BSA 等传统封闭液,通用于常规抗体、磷酸化抗体、生物素标记抗体。
使用本产品,整个封闭过程仅需 10min,无需洗涤,即可直接孵育一抗;总体效果显著优于传统的基于BSA (牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白 (Casein) 等的封闭液及国外同类产品。
本产品配制在 TBST中,含0.1% TWEEN20 。
订购信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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快速封闭液(即用型,免洗) |
AP36L106 |
50mL |
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快速封闭液(即用型,免洗) |
AP36L108 |
500mL |
运输与保存
蓝冰运输。4℃保存,有效期12个月。
使用方法
Western Blot 中膜的封闭
- 完成转膜后,用 Western 洗涤液洗涤蛋白膜 1-2 min 。
- 根据膜的大小,将一定体积的快封液倒入平皿或者其它适当容器中,确保封液后续能充分覆盖膜即可。对于常规的 western,一张约 6.6×8.5cm 的膜推荐使用约 10mL 左右的快封液。
- 用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在 WB 无蛋白封闭液(1 X in TBST)中,使封闭液完全浸没膜,置于水平摇床上封闭约 10 min(经多种抗体的测试封闭 10 min的效果很多时候会显著优于常规的 BSA封闭 1 h的效果)。
- 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。
注意事项
- 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗,例如一些内参抗体,快封液可以重复使用 2-3 次。回收的快封液请勿与未使用过的快封液混合。
- 通常本产品用于 PVDF 膜及 NC 膜时的封闭时间为 10 min。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60 min。此外,如有特殊需要,也完全可以 4ºC 封闭过夜。
- 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
- 取放 PVDF 膜和 NC 膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
- PVDF 膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据 Western 进行到的具体步骤可放置于 western 转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
- 仅用于封闭使用,不可用于一抗二抗稀释。
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文献和实验点)也是个可有可无的步骤,真正对降低背景起核心作用的是抗体稀释液中的组分。当你的抗体使用次数较多时,基本不用封闭也可以有较低的背景;如果抗体很新,其实封闭最短可以缩减到5min(没试过更短的,不一定不可以)。那什么导致高背景甚至黑板呢?抗体的质量不太好(主因),或者抗体稀释液的配方有问题(增大抗体稀释比略微有所改善)。封闭液的配方可以和抗体稀释液相同,也可以不同;通常封闭液是最简单(单方)的抗体稀释液,而抗体稀释液可能是复方。封闭很少出状况。不过在milk做封闭剂的封闭液中,milk颗粒未完全溶解时,微小
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的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,经检测其灵敏度高于同类产品,特别是针对核抗原,其渗透性特别强,适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。 原理示意图: 实验试剂 1. 即用型SABC(过氧化物酶)试剂盒(博士德货号SA1021,SA1022) 2. 即用型SV(HRP辣根过氧化物酶)试剂盒(博士德货号SV0001,SV0002
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