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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
Recombinant Interleukin 11 (IL11)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 马白介素11(IL11)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D7248 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Equus caballus; Equine (Horse,马) |
英文别名:AGIF; Adipogenesis Inhibitory Factor; Oprelvekin
物种:Equus caballus; Equine (Horse,马)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:19.1kDa
实际分子量:19kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ala58~Leu199 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:11.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | CD1B & B2M重组人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein |
| CLIAKitforDolichosbifowsagglinin,DBAELISAKit双花扁豆凝集素规格:48T/96T | HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) |
| 细胞染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒10次 | 趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2) |
| Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格:96T/48T | DLL4重组人 DLL4 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 大鼠芳香烃受体核转位因子样蛋白(ARL)ELISA试剂盒 ,英文名: ARL ELISA Kit | ABL1 Protein Human 重组人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 标签) |
| HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | CA10 Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 |
| HumanNephrinELISA试剂盒人蛋白(nephrin)ELISA试剂盒规格:96T/48T | PDGF-A 血小板源性生长因子-1(抗原 0.5mgPDGF-A 血小板源性生长因子-1(抗原) |
| 组织总胆汁酸酶循环比色法定量检测试剂盒20次 | HA重组甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His |
| HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | FETUB重组小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 标签) Protein |
| 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | CST1 Protein Human 重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 (His 标签) |
| Sophora japonica agglinin (SJA) ELISA Kit 槐凝集素(SJA)ELISA试剂盒 | CLEC4D重组人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白 (His 标签) Protein |
| Mouseierleukin10,IL-10ELISAKIT 小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | TMUB2 Protein Human 重组人 TMUB2 蛋白 (His 标签) |
| 无激素精制胎牛血清100毫升 | 颗粒酶A(GZMA)重组蛋白 Recombinant Granzyme A (GZMA) |
| CLIAKitforHumangolgiprotein73,GP-73ELISAKit人高尔基蛋白73规格:48T/96T | 马白介素11(IL11)重组蛋白EFNB3 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 标签) |
| ELISAKitTAb大鼠甲状腺素抗体规格:48T/96T | FGFBP3重组人 FGFBP3 蛋白 (His 标签) Protein |
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文献和实验重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展广州精达公司-美国免疫学博士 胡勇摘要 抗体是免疫诊断试剂领域最重要的原料,蛋白A是纯化抗体最有效的工具,广泛用于免疫诊断试剂的许多领域。重组蛋白A具有产量大,成本低,纯度高,特异性好的优点。重组蛋白A的国产化将极大促进免疫诊断试剂的产品开发和市场效益。 关键词 抗体纯化 免疫诊断试剂 重组蛋白A 国产化蛋白A(Protein A)为金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,具有与人类和哺乳动物血液中免疫球蛋白IgG分子的Fc段特异性结合
【原创】真核表达His蛋白,进行天然构象蛋白纯化的心得和疑问。
cm的转染HEK。我想知道,裂解液流出去之后为毛有N多his蛋白没结合上?请选择:A)蛋白量太大树脂太少 B)由于过表达导致His形成包涵体流出来了 C)孵育时间不够长或者温度不够高 D)pH我控制的不好,我用的7.5-8左右,偏碱性。选A的童鞋要告诉我,一盘子的HEK大约能产生多少ug的重组蛋白?!!这个很重要,据罗氏哼哼它能结合40mg蛋白/ml树脂;选B的童鞋告诉我,真核过表达做纯化需要注意神马;选C的童鞋说说,孵育时间多长或者神马温度结合效率会比较高,求经验;选D的童鞋详细说说等电点怎么算,酸碱
洗脱层析的比较见表2。重组蛋白质的纯化经常会遇到如下问题, 即虽经过多次不同层析技术的分离,目标蛋白中仍有无法去除的杂蛋白,这些杂蛋白在分子量大小和所带电荷数均极为相似, 有的甚至就是目标蛋白的折叠异构物。因而极难除去,常令纯化工作者头疼。 利用置换层析这一具有高分辨率的方法常常可以起到特殊的效果。 1997年,Amitava Kunda和Steven Camer报道利用小分子量的置换剂将离子交换层析和分子筛层析不能分离的牛细胞色素C和马细胞色素C完全分开。 此外,置换层析的另一大优点
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