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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 英文名:
Recombinant Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6879 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) |
英文别名:Keratinocyte growth factor 2
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:23.1kDa
实际分子量:23kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Gln38~Ser208 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:10.0
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| IL-12P40(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 | EFNB1重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein |
| humanNeuregulin1,G-1ELISA试剂盒人神经调节蛋白1(G-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TLK1 Protein Human 重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) |
| HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)ELISA试剂盒规格:96T/48T | FGFR2重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 标签) Protein |
| 大鼠胶原交联(PYD)ELISA试剂盒 ,英文名: PYD ELISA Kit | CNTN3 Protein Rat 重组大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (His 标签) |
| 人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA检测试剂盒HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit 96T/48T | APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉样肽前体蛋白(多肽抗原) |
| HumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit人腮腺炎病毒IgMELISA试剂盒规格:96T/48T | DPEP1 Protein Human 重组人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白 (His 标签) |
| 兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| Human thymosin (Thymosin) ELISA Kit 人胸腺肽(Thymosin)ELISA试剂盒 | MCAM Protein Mouse 重组小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 标签) |
| Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit 人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | RTN4R重组小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His 标签) Protein |
| Humaneosinophilchemotacticfactor,ECFELISA试剂盒人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3ELISA试剂盒人美丽线虫凋亡基因(CED-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T | NRP1重组食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| Humancytokeratin20,CK20ELISAKit人细胞角蛋白20(CK20)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原 |
| 山羊睾(T)免疫试剂盒 Goat Testosterone ELISA Kit | YWHAH Protein Human 重组人 14-3-3 eta / YWHAH 蛋白 (GST 标签) |
| 犬维生素A(VA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)重组蛋白CD38(human 0.5mgCD38(human) CD38抗原(人) |
| 脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒 ,英文名: BNP ELISA Kit | IL2RG重组人 IL2RG / CD132 蛋白 (His 标签) Protein |
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验来自于 HIV 病人,在这种特殊的情况下,我们希望能够对样本做固定处理或者是预固定处理,这样会大大增加操作人员的安全性。对蛋白翻译后修饰的检测在蛋白翻译后修饰(磷酸化、乙酰化、甲基化等)的研究过程中,固定剂不仅可以有效的「固定」住翻译后修饰的位点(丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸等),也可以防止目标位点在活细胞中很快降解(比如磷酸酶会去除磷酸化修饰、去甲基化酶会移除甲基化修饰等)。下面的例子是用 IL- 6 的重组蛋白刺激人外周血 15 分钟后看 STAT3 第 705 位酪氨酸的磷酸化水平,在刺激完样本后就需要
Bio 大部分抗体和重组蛋白,比较合适的保存方式是:抗体分装后保存在 - 20℃,重组蛋白分装后保存在 - 80℃。(1)分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体和重组蛋白造成的污染可能性。(2)分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于 10µl 每份。因为分装体积越小,抗体和重组蛋白的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。(3)复融后的分装抗体和重组蛋白如果一次用不完,将剩余母液保存在 4℃,避免再冻起来。(4)抗体和重组蛋白工作液应该
一. 实验目的1. 掌握重组蛋白诱导表达的方法。2. 亲和层析法纯化His 标记的融合蛋白。二. 实验原理将目的基因连接在表达载体后,通过加入诱导剂IPTG诱导目的基因表达。表达载体除具有蛋白表达所需要的启动子外,在终止子前有6个His编码序列,便于蛋白的亲和层析纯化。亲和层析以蛋白质或生物大分子和结合在介质上的配基间的特异亲和力为基础。本实验采用磁座和结合有Ni2+的磁珠在变性或非变性条件下对融合蛋白进行分离纯化,只需通过“结合-清洗-洗脱”三个简单的操作步骤就可完成。该系统可根据样本量灵活
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