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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
Recombinant Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 牛转化生长因子β1(TGFb1)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6710 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) |
英文别名:TGF-B1; CED; DPD1; LAP; Camurati-Engelmann Disease; Latency-associated peptide
物种:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌, 细胞外基质
预测分子量:42.8kDa
实际分子量:45kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ala279~Ser390 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:7.2
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量检测试剂盒20次 | RTN4R重组小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His 标签) Protein |
| Ratplateletactivatingfactor,PAFELISAKit大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | YWHAH Protein Human 重组人 14-3-3 eta / YWHAH 蛋白 (GST 标签) |
| 大鼠抗胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒 ,英文名: ICA ELISA Kit | IL2RG重组人 IL2RG / CD132 蛋白 (His 标签) Protein |
| Mouse mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒 | APCS Protein Mouse 重组小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 (His 标签) |
| RatiactParathormone,i-PTHELISAKit 大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗原 0.5mgCD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗原 |
| 豚鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 ,英文名: TE ELISA Kit | CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) |
| Human dopamine D1 receptor (D1R) ELISA Kit 人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒 | FCGRT & B2M重组人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein |
| Rabbitsolubleadhesionmolecules,SamELISAKit 兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | EPCAM Protein Mouse 重组小鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 标签) |
| CLIAKitforBeta-TGELISAKit大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白规格:48T/96T | IL13RA2重组狗 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 细菌同化型盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次 | KIT Protein Rat 重组大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (His 标签) |
| HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISAKit人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒规格:96T/48T | REG3A重组大鼠 REG3A 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 人C型尿肽(CNP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8 0.5mgFGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8 (抗原) |
| 前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA试剂盒 ,英文名: PAP ELISA Kit | TLK2 Protein Human 重组人 TLK2 / PKU-ALPHA 蛋白 (aa 397-772) |
| 兔维受体应答蛋白2(RARRES2)免疫试剂盒 Rabbit Retinoic acid receptor responder protein 2,RARRES2 ELISA kit | 牛转化生长因子β1(TGFb1)重组蛋白NPY1R (neuropeptide Y1 receptor 0.5mgNPY1R (neuropeptide Y1 receptor) 神经肽Y1受体抗原 |
| RabbitHeatShockProtein70,HSP-70ELISA试剂盒兔热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格:96T/48T | VEGFA重组人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白 Protein |
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文献和实验蛋白、含二硫键蛋白在体外成功复性。 包涵体形成的原因 重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,无论是原核表达体系或真核表达体系甚至高等真核表达体系,都会形成包涵体[2]。主要因为在重组蛋白的表达过程中,缺乏某些蛋白质折叠过程中需要的酶和辅助因子,或环境不适,无法形成正确的次级键等原因形成的[3]。 1、 表达量过高,研究发现在低表达时很少形成包涵体,表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成速度太快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,过多的蛋白间的非特异
(Tumornecrosisfactor,TNF)根据其产生来源和结构不同,可分为TNF-α和TNF-β两类,前者由单核-巨噬细胞产生,后者由活化T细胞产生,又名淋巴毒素。TNF除具有杀伤肿瘤细胞外,还有免疫调节、参与发热和炎症的发生。 5,转化生长因子-β家族(Transforminggrowthfactor-βfamily,TGF-βfamily)主要包括TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2以及骨形成蛋白(BMP)等。 6.趋化因子家族(Chemokinefamily)包括两个亚族:(1)C-X-C
9.23 上交复旦Science子刊揭示靶向YY1有望治疗糖尿病肾病
① 上交复旦Science 子刊揭示靶向 YY1 有望治疗糖尿病肾病转化生长因子β1(TGFβ1,由基因 TGFB1 编码)已被确定为糖尿病肾病产生的主要致病因子。然而,当前的拮抗 TGFβ1 的策略未能在临床试验中表现出有益的治疗结果。在一项新的研究中,来自中国上海交通大学和复旦大学等研究机构的研究人员为了鉴定出一种不同的治疗方法,设计出一种基于质谱的 DNA-蛋白相互作用筛选方法,以便发现与 TGFβ1 启动子结合的转录阻遏物。他们鉴定出一种称为阴阳 1(Yin Yang 1, YY
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