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24
- 英文名:
Recombinant Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES)
- 供应商:
上海联祖
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- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 小鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6693 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
英文别名:CCL5; SCYA5; SISd; EoCP; Chemokine C-C-Motif Ligand 5; Eosinophil Chemotactic Cytokine; T-cell Specific Protein p288; Small Inducible Cytokine Subfamily A(Cys-Cys)Member 5
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:37.9kDa
实际分子量:40kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ser24~Ser91 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| CLIAKitforODFELISAKit大鼠破骨细胞分化因子规格:48T/96T | MME重组小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 标签) Protein |
| 体内(invivo)超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒20次 | LMAN2 Protein Human 重组人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 标签) |
| ELISAKitβManase人β甘露糖苷酶规格:48T/96T | AFP重组人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 标签) Protein |
| 大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | IGFBP4 Protein Mouse 重组小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 标签) |
| 人山梨醇脱氢酶(SDH)免疫试剂盒 Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit | CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原 |
| RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit兔子白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T | OSM Protein Human 重组人 Oncostatin M / OSM 蛋白 |
| 豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | CD3E重组人 CD3e / CD3 epsilon 蛋白 (His 标签) Protein |
| Rat vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 大鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒 | VEGFC Protein Human 重组人 VEGF-C 蛋白 (His 标签) |
| HumanAnnexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | DPP4重组食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISA试剂盒人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CST3 Protein Mouse 重组小鼠 Cystatin C / CST3 蛋白 (His 标签) |
| Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISA试剂盒人抗髓0脂抗体IgA(AMAIgA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | RSV-F重组人类呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanCaspase12,Casp-12ELISAKit人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Tn-C(Tenascin-C 0.5mgTn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原 |
| 兔血栓素A2(TXA2)免疫试剂盒 Rabbit Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit | TGFBR1 Protein Human 重组人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (aa 200-503, His & GST 标签) |
| 人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | 小鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)重组蛋白IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1 0.5mgIL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受体相关蛋白样1前体蛋白(抗原) |
| 羟脯酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒 ,英文名: HRGP ELISA Kit | SGK3重组人 SGK3 / SGKL 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验的浓度是否适合诱导,生长状态不好的表达菌,一方面会造成目的蛋白的错误折叠,造成蛋白大小,形态等发生改变,另一方面会因为IPTG的加入,导致菌体的死亡或者降解。低温度诱导有助于蛋白二硫键的正确折叠,但对于高温表达的蛋白不适合低温状态,温度过高容易导致包涵体的形成。2.诱导剂:基因的诱导表达基于乳糖操纵子调节机制,没有乳糖存在的时候,阻碍物基因产生阻碍蛋白,阻碍蛋白和操纵子结合,抑制基因的表达;当有乳糖存在的时候,B-半乳糖苷酶和乳糖作用产生异半乳糖,异半乳糖和阻碍蛋白结合,解除抑制,激活基因,开始表达
干细胞或分化不同阶段的造血细胞在半固体培养基中形成不同的细胞集落,分别命名为G-CSF、M-CSF、GM-CSF、SCF、EPO等。不同CSF不仅可刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖的分化,还可促进成熟细胞的功能。 3,干扰素(Interferon, IFN)是某些病毒感染的细胞产生一种物质,可干扰病毒的感染和复制。根据干扰素的来源和结构,可分为IFN-α、IFN-β和IFN-γ,分别由白细胞、成纤维细胞和活化T细胞所产生,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。 4,肿瘤
,这些黏附分子被推测与嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)的释放,趋化性以及嗜酸性粒细胞的穿透转移相关。而这三种现象由多种细胞因子介导并增强,包括干扰素γ、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素1(IL-1);趋化因子包括调节激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、IL8、MCP-1和巨噬细胞炎症蛋白-1(MIP-1)。这类炎性细胞因子激活细胞间信号级联反应包括MAPK和NF-κB信号转导途径。 活化T细胞的产物中嗜酸性粒细胞激活细胞因子(IL5,IL3,GMCSF)是哮喘发病的基础,已有研究显示
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