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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 英文名:
Recombinant Neurotrophin 3 (NT3)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 鸡神经营养因子3(NT3)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6665 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Chicken (Gallus,鸡) |
英文别名:NTF3; HDNF; NGF2; Nerve Growth Factor 2; Neurotrophic Factor
物种:Chicken (Gallus,鸡)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
:
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫试剂盒 Human ENA-78 ELISA Kit | CD28重组小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 标签) Protein |
| Mousehiston-H2bELISAKit小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签) |
| CASPASE-4蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次 | CMBL重组人 CMBL 蛋白 (His 标签) Protein |
| humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6,MKK6ELISA试剂盒人原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)ELISA试剂盒规格:96T/48T | LCN2 Protein Mouse 重组小鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 (His 标签) |
| HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAKit人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 0.5mgCGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 ) 软骨糖蛋白39(多肽) |
| humanC-typelectindomainfamily4membere,CLEC4EELISA试剂盒人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA试剂盒规格:96T/48T | BIRC2 Protein Human 重组人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 标签) |
| 组织EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | HA重组甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanProinsulin,PIELISAKit人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒规格:96T/48T | PVR Protein Mouse 重组小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 标签) |
| 豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 ,英文名: IgE ELISA Kit | CD4重组食蟹猴 CD4 蛋白 (His 标签) Protein |
| Human low density lipoprotein receptor related protein 6 (LRP-6) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒 | IFNA13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (His 标签) |
| 趋化因子配体17(CXCL17)ELISA试剂盒 ,英文名: CXCL17 ELISA Kit | SCARB1重组小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白 (His 标签) Protein |
| Rabbitcatecholamine,CAELISA试剂盒兔儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒Rabbitcatecholamine,CAELISA试剂盒规格:96T/48T | CD62L (ELAM-1/L-Selectin 0.5mgCD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L选择素抗原 |
| HumanCaldesmon,CALDELISAKit人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒规格:96T/48T | SUB1 Protein Human 重组人 SUB1 蛋白 (His 标签) |
| Humanai-hepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 鸡神经营养因子3(NT3)重组蛋白Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e 0.5mgIntegrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原 |
| 人P53抗体(P53-ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | CSF1重组人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 标签) Protein |
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文献和实验Key words: chronic stress,hippocampus, NGF、NT-3,forced-swimming, porsolt swim test porsolt swimtest 神经生长因子(neuron growth factor NGF)是第一个被发现、也是生物学功能了解得最清楚的一个神经营养因子。NGF对皮质、海马、基底前脑的胆 碱能神经元有神经营养作用。[1] 它和神经营养因子3(neurotrophin
慢性应激对大鼠海马NGF、NT-3表达的影响及应激停止后的变化
元有神经营养作用。 [1] 它和神经营养因子3(neurotrophin3, N T-3 )广泛地分布在海马、大脑皮层、中隔等中枢神经系统中,它们在神经保护、突触再生、神经损伤后功能重建等方面也发挥了重要作用。应激事件导致神经化学方面的改变可能参与了抑郁障碍的发生,此外,神经内分泌、神经递质和神经可塑性的改变在抑郁障碍的发生中也起到十分重要的作用。 [2] 本研究利用免疫组化的方法观察NGF、NT3在慢性应激以及应激过后在海马的表达变化,以了解NGF、NT 3
隆抗体的研制。与传统的动物免疫方法不同,杂交瘤技术可以产生针对特定抗原的高纯单克隆抗体,并可大量生产单克隆抗体。由于其极强的特异性,杂交瘤抗体技术已广泛应用于生物学、药学、医学等领域,具有极其广阔的应用前景。 普健生物杂交瘤抗体技术平台 1.免疫方式:多肽、重组蛋白(五大表达系统)、小分子和DNA免疫等多种方案 2.一站式服务:提供从基因序列到杂交瘤细胞开发及鉴定的整体解决方案 3.高效电融合技术:美国BTX公司ECM 2001电融合仪平台,高效、无毒 4.成功率高:单抗
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