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文献和实验标准贮备液0.25 ml、0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml和4.0 ml至5个50 ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,取上述不同浓度的标准溶液2 μl进样,测定各自峰面积(Y)。以丙酮浓度X对其峰面积Y作线性回归,回归方程为Y(峰面积)=4 574.5+262.7X(浓度)。相关系数r=0.996。结果表明:丙酮浓度在25 μg/ml~400 μg/ml范围内呈线性关系,结果见表1。 表1 丙酮浓度与相应峰面积的关系丙酮浓度(略) 3.3回收率试验 分别精密量
(1)分析天平、台式天平 (2)刻度吸管 (3)具塞试管、试管架 (4)研钵 (5)离心机、离心管 (6)烧杯、量筒 (7)微量取样器 (8)分光光度计 3. 试剂 (1)牛血清白蛋白标准溶液的配制:准确称取100mg 牛血清白蛋白,溶于100mL 蒸馏水中,即为1 000μg/mL 的原液。 (2)蛋白
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
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