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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
49
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
抗体标记
- 抗体英文名:
Biotin-Linked Polyclonal Antibody to Interferon Alpha (IFNa)
- 抗体名:
兔干扰素α(IFNa)多克隆抗体(生物素标记)
- 标记物:
生物素标记
- 适应物种:
Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔)
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
500μg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
产品名称:兔干扰素α(IFNa)多克隆抗体(生物素标记)
英文名称:Biotin-Linked Polyclonal Antibody to Interferon Alpha (IFNa)
别名:IFNA1; IFL; LeIF D; IFN; IFN-Alpha; IFNA13; IFN-A; IFNAP22; IFN-Alpha 1b; Interferon Alpha 1b; Interferon, Leukocytic; IFN, Leukocyte; Interferon alpha-D
细胞因子 感染免疫
物种 Oryctolagus cuniculትት
| 货号 | 规格 | 产品名称 |
| LZ-KH1661 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | 兔干扰素α(IFNa)多克隆抗体(生物素标记) |
Ig类型 IgG
纯化方式 抗原特异性亲和纯化
标记物 生物标记
原抗体-
缓冲液成份 磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有0.02% NaN3和50%甘油)
性状 液体
浓度 500μg/mL
且适物种 -
应用 WB; IHC; ICC.
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体
特异性
该抗体是针对IFNa的兔多克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别IFNa。
用法
免疫印迹:0.2-2μg/mL;1:250-2500
免疫组织化学:5-20μg/mL;1:25-100
免疫细胞化学:5-20μg/mL;1:25-100
稀释倍数最终由用户决定。
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
什么是多克隆抗体,单克隆抗体?
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
公司正在出售的产品:
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| HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | RASSF2 英文名称: Ras相关结构域蛋白质2抗体 0.2ml |
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| Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISAKit人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Phospho-Pin1 (Ser16) 英文名称: 0酸化肽基脯酞顺反异构酶Pinl抗体 0.1ml |
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| Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Thymidylate synthase 英文名称: 胸苷酸合成酶抗体 0.1ml |
| Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Hamartin 英文名称: 结节性硬化症蛋白1抗体 0.1ml |
| ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Phospho-IKK alpha/beta (Ser176 + Ser180) 英文名称: 0酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体 0.1ml |
| ELISAKitIL-12/P70大鼠白介素12规格:48T/96T | MEK4 英文名称: 原活化蛋白激酶激酶4抗体 0.1ml |
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| RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受体(PROGR)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 兔干扰素α(IFNa)多克隆抗体(生物素标记)Inhibin beta B 英文名称: 抑制素βB/Inhibin β B抗体 0.1ml |
| HumanDiphtheriaaibodyELISAKit人白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T | PLEKHA7 英文名称: PLEKHA7蛋白抗体 0.1ml |
| Humanesogen,EELISAKit人雌激素(E)ELISA试剂盒规格:96T/48T | OPA1 英文名称: 视神经相关蛋白1抗体 0.2ml |
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文献和实验【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
2ml(获得0.5-1ml免疫前血清)完全弗氏佐剂(CFA)混合的200μg抗原免疫兔。第2星期完全弗氏佐剂(CFA)混合的200μg抗原免疫兔。第4星期不完全弗氏佐剂(IFA)混合的100μg抗原免疫兔。第5星期取检测血清20-30ml取适当的细胞或组织进行ELISA和WB检测,溶解在生理盐水中的100μg抗原免疫兔。第6星期如果检测阳性第一次采血20-30ml,溶解在生理盐水中的100μg抗原免疫兔;如果上次检测是阴性,取适当的细胞或组织进行ELISA和WB检测。第7星期第二次采血20-30
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