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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
41
- 克隆性:
单克隆
- 抗原来源:
单抗制备
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Growth Differentiation Factor 6 (GDF6)
- 抗体名:
人生长分化因子6(GDF6)单克隆抗体
- 标记物:
无标记物
- 宿主:
小鼠
- 适应物种:
Homo sapiens (Human,人)
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
1mg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
公司产品仅供科研研究实验
产品名称:人生长分化因子6(GDF6)单克隆抗体
英文名称:Monoclonal Antibody to Growth Differentiation Factor 6 (GDF6)
别名:BMP13; CDMP2; GDF16; Bone morphogenetic protein 13; Growth/differentiation factor 16
细胞因子 信号转导 发育科学 骨骼代谢
物种 Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
| 货号 | 规格 | 产品名称 |
| LZ-KH1389 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | 人生长分化因子6(GDF6)单克隆抗体 |
宿主 小鼠
效价(克隆号)-
Ig亚型 IgG
纯化方式 抗原特异性亲和纯化
标记物 无标记物
免疫原-
缓冲液成份 磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有0.02% NaN3和50%甘油)
性状 液体
浓度 1mg/mL
且适物种 -
应用 WB; IHC; ICC; IP.
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体。
特异性
该抗体是针对GDF6的小鼠单克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别GDF6。
用法
免疫印迹:0.2-2μg/mL;1:500-5000
免疫组织化学:5-20μg/mL;1:50-200
免疫细胞化学:5-20μg/mL;1:50-200
稀释倍数最终由用户决定。
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
公司正在出售的产品:
| HumanProteinSELISA试剂盒人蛋白S(ProteinS)ELISA试剂盒规格:96T/48T | GMPR2 英文名称: 鸟苷酸还原酶2抗体 0.2ml |
| Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISA试剂盒人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒规格:96T/48T | PHKG1 英文名称: 0酸化酶激酶γ1 0.2ml |
| 细胞半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性比色法定量检测试剂盒20次 | LDB3 英文名称: LIM结构域结合蛋白3抗体 0.1ml |
| 组织过氧化氢酶(CATALASE)催化活性比色法定量检测试剂盒20次 | RBMX 英文名称: 糖蛋白P43抗体 0.2ml |
| 体液脯氨酸羟化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量检测试剂盒20次 | HRH4/GPCR105 英文名称: 组织胺H4受体抗体 0.1ml |
| ELISAKitPL-A2小鼠0脂酶A2规格:48T/96T | Phospho-PLC gamma 2(Tyr753) 英文名称: 0酸化0酯酶Cγ2抗体 0.1ml |
| Humangranulocytechemotacticprotein-2,GCP-2ELISA试剂盒人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒规格:96T/48T | NEK1 英文名称: 丝酸/苏酸蛋白激酶NEK1抗体 0.2ml |
| 植物亮氨酸(leucine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次 | TIMP-4 英文名称: 金属蛋白酶组织抑制因子-4抗体 0.1ml |
| HumanPlaceaCadherin,P-cadELISA试剂盒人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HBeAg(2E6) 英文名称: 人乙型肝炎e抗原单克隆(检测)抗体 0.1ml |
| ELISAKitTF兔子组织因子规格:48T/96T | Phospho-Insulin Receptor Beta (Tyr1355) 英文名称: 0酸化胰岛素受体β抗体 0.1ml |
| 石蜡切片免疫荧光显微镜间接检测试剂盒(含荧光二抗)20次 | Methamphetamine 英文名称: 甲基抗体 0.1ml |
| 组织ERK1/2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | SIT 英文名称: 跨膜接头蛋白SIT抗体 0.1ml |
| 糖蛋白标准样品——辣根过氧化酶1毫克 | 人生长分化因子6(GDF6)单克隆抗体Integrin Alpha 3 + Beta 1 英文名称: 整合素α3β1抗体 0.2ml |
| ELISAKitGL2猪葡萄糖转运蛋白2规格:48T/96T | PMCA3 英文名称: ATP酶钙离子转运蛋白PMCA3抗体 0.2ml |
| HumanChorionicGonadoophin,HCGELISA试剂盒人绒毛膜促性腺激素(HCG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Os05g0477200 protein 英文名称: 水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体 1ml |
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文献和实验1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
以单克隆抗体为基础的免疫治疗 第1代单抗诞生于1975年,来源于小鼠的B细胞杂交瘤,称为鼠源单抗。但人的免疫系统会识针对此类识别单抗产生人抗鼠抗体,将其清除出体外而限制了它的应用。随后研制了人源化单抗,并于1988年进行了第1次商业性的临床试验。人源化单抗与鼠源单抗相比,具有以下的优点:特异性较强;不易发生过敏反应及免疫复合性疾病;在人体内维持的时间较长;可制备用于人的抗独特型抗体。制备人源化单抗可以采用人―鼠杂交瘤技术、人―人杂交瘤技术、EB病毒转化技术、EB病毒转化
1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
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