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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
42
- 克隆性:
单克隆
- 抗原来源:
单抗制备
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a)
- 抗体名:
人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3a)单克隆抗体
- 标记物:
无标记物
- 宿主:
小鼠
- 适应物种:
Homo sapiens (Human,人)
- 免疫原:
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3a)重组蛋白
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
1mg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3a)单克隆抗体 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | LZ-KH0918 |
英文名称:Monoclonal Antibody to Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a)
别名:CCL20; CKb4; LARC; MIP3-A; SCYA20; ST38; Small Inducible Cytokine Subfamily A(Cys-Cys)Member 20; Beta-Chemokine Exodus-1; Liver And Activation-Regulated Chemokine
细胞因子 感染免疫
物种 ၎辀၎
来源 单抗制备
宿主 小鼠
效价(克隆号)A3
Ig亚型 N/A
纯化方式 蛋白A + 蛋白G亲和纯化
标记物 无标记物
免疫原-巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3a)重组蛋白
缓冲液成份 0.01M 磷酸盐缓冲液(pH7.4,containing 0.05% Proclin-300,50% glycerol)
性状 液体
浓度 1mg/ml
且适物种 -
应用 WB; IHC; ICC; IP.
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体。
特异性
该抗体是针对MIP3a的小鼠单克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别MIP3a。
用法
Western blotting: 0.01-3μg/mL;
Immunohistochemistry: 5-30μg/mL;
Immunocytochemistry: 5-30μg/mL;
Optimal working dilutions must be determined by end user.
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
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| Humancyclooxygenase-2,COX-2ELISAKit人环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-PRMT1 蛋白质精氨酸甲基转移酶1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
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文献和实验B细胞、树突状细胞 肾小球上皮细胞 CR2 C3d受体 EB病毒受体 CD21 Ic3b、C3dg C3d、EB病毒、 1FN-α B细胞、树突状细胞 CR3 iC3b受体 Mac-1抗原 CD11b/CD18 IC3b、植物凝集素、某些细胞多糖 中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、NK细胞 CR4 gp150/95 CD11C/CD18 Ic3b、C3d、C3dg 中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、血小板 一、CR1(CD35)
外的其它血细胞。 (3)FeγRⅢ(CD16):为50~70kD糖蛋白,属Ig超家族,有2个C2结构。主要分布于巨噬细胞、NK细胞和嗜酸性粒细胞,中性粒细胞表面。 图6-2 人Feγ(上图)和人Feα、Feε受体(下图)结构示意图 2.FeγR的功能 FeγR的功能主要是通过髓样细胞和NK细胞来发挥的。 (1)单核-巨噬细胞:FeγRⅠ、Ⅱ和Ⅲ均可介导入单核细ADCC来杀伤肿瘤等靶细胞。这种ADCC效应为Mg
爆发。另外,由于CR3最初是通过用Mac-1单克隆抗体的白细胞上发现的,因而也称其为Mac-1抗原。CR3和CR4对固相的C3bi具有相似的结合特异性,二者均需要有二价的阳离子参与,并均可被EDTA所抑制。与CD4不同的是,CR3还具有能与细菌LPS和 酵母 菌细胞壁上β葡聚糖相结合的部位,也需2价阳离子参与。CR3分布于中性粒细胞、单核-巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、NK细胞及细胞毒性T细胞和B细胞,其配体为C3bi。CR3的主要生物学活性是细胞粘附作用。它可促使效应细胞与靶细胞之间的密切接触增强
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