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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Penicillium islandicum
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
产品名称:岛青霉染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Penicillium islandicum
产品规格:50T
保存及有效期:请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:样品模板
产品特点:
1. 一站式,用户不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。
岛青霉染料法荧光定量PCR试剂盒包装规格及成分(具体信息详见说明/书):
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 说明/书 |
使用手册 | 1 份 |
岛青霉染料法荧光定量PCR试剂盒注意事项:
1.所有操作严格按照说明/书进行;
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验,不靠壁,不贴液面。 混匀平均分装的注意事项: 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下,以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀,不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) (FQ
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
-100透化15min。随后用4%牛血清白蛋白(BSA)封闭,依次加入一抗(靶蛋白)和二抗孵育(孵育时间和保存温度根据抗体类型调整)。用DAPI染细胞核,在显微镜下观察样本。计算靶蛋白阳性细胞数(N)与总细胞数(M)的比值,记为X=N/M。 ④标志物基因(实时荧光定量PCR):使用商用RNeasy试剂盒或TRIzol法提取总RNA,然后用商用cDNA合成试剂盒进行逆转录。使用实时荧光定量PCR系统进行qPCR检测(实验组设置3个独立样本)。以商业化的人肠道(小肠或大肠)RNA作为阳性对照,GAPDH
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