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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
37
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
- 抗体名:
犬转化生长因子β1(TGFb1)多克隆抗体
- 标记物:
无标记物
- 宿主:
兔
- 适应物种:
Canis familiaris; Canine (Dog,犬)
- 免疫原:
转化生长因子β1(TGFb1)重组蛋白
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
500μg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 犬转化生长因子β1(TGFb1)多克隆抗体 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | LZ-KD0023 |
英文名称:Polyclonal Antibody to Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
别名:TGF-B1; CED; DPD1; LAP; Camurati-Engelmann Disease; Latency-associated peptide
细胞因子 肿瘤免疫 感染免疫
物种 Canis familiaris; Canine (Dog,犬)
来源 多抗制备
宿主 兔
效价 -
Ig类型 IgG
纯化方式 抗原特异性亲和纯化
标记物 无标记物
免疫原-转化生长因子β1(TGFb1)重组蛋白
缓冲液成份 磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有0.02% NaN3和50%甘油)
性状 液体
浓度 500μg/mL
且适物种 Homo sapiens (Human,人), Mus musculus (Mouse,小鼠), Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
应用 WB; IHC; ICC; IP.
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体。
特异性
该抗体是针对TGFb1的兔多克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别TGFb1。
用法
Western blotting: 0.5-2μg/mL;
Immunohistochemistry: 5-20μg/mL;
Immunocytochemistry: 5-20μg/mL;
Optimal working dilutions must be determined by end user.
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
热以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定,具体方法如下:在37°C孵育48小时,没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内,在适当的条件下存储,损失率低于5%
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
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什么是多克隆抗体,单克隆抗体?
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
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文献和实验9.23 上交复旦Science子刊揭示靶向YY1有望治疗糖尿病肾病
① 上交复旦Science 子刊揭示靶向 YY1 有望治疗糖尿病肾病转化生长因子β1(TGFβ1,由基因 TGFB1 编码)已被确定为糖尿病肾病产生的主要致病因子。然而,当前的拮抗 TGFβ1 的策略未能在临床试验中表现出有益的治疗结果。在一项新的研究中,来自中国上海交通大学和复旦大学等研究机构的研究人员为了鉴定出一种不同的治疗方法,设计出一种基于质谱的 DNA-蛋白相互作用筛选方法,以便发现与 TGFβ1 启动子结合的转录阻遏物。他们鉴定出一种称为阴阳 1(Yin Yang 1, YY
(一)细胞增殖法 IL-2可刺激某些淋巴细胞增殖,根据细胞增殖情况可反映IL-2的活性,结果以U/ml表示。目前所用的IL-2反应细胞主要有CTLL、CTB6、F12、CTLL-2等小鼠IL-2依赖细胞株以及ConA活化的小鼠淋巴母细胞和小鼠胸腺细胞。这类细胞的增殖情况均可通过显微镜下直接计数、3H-TdR掺入法以及MTT法加以测定。 1.依赖性细胞株增殖法IL-2依赖细胞株在IL-2存在时才能生长,而对PHA、ConA等促有丝分裂原及IL-2以外的其它细胞因子均无反应
(交流)SELEX技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)
有三条:一是经典途径,即通过免疫动物产生多克隆抗体;二是细胞工程途径即用杂交瘤技术生产单克隆抗体;三是利用基因工程途径表达和改造抗体。 但是,蛋白类抗体的生产与应用存在如下限制: 毒性抗原免疫动物承受不了,免疫原性弱的难以产生抗体; 杂交瘤产生于鼠,治疗应用受限(HAMA);异源抗体在诊断中产生非特异性反应(假阳性),还受到类风湿因子和自身抗体的干扰; 成本高、费时费事,罕见抗体需大量筛选才能得到; 克隆株(细胞)的有效保存不易,有些杂交瘤难以在体内生长; 批间
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