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文献和实验内的，而酶只有在甘油浓度 具体操作如下：在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA（1 μg/μl）20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶（10 U/μl）5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好，可以延长消化时间，但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积，或者补充酶再消化。如仍不能奏效，可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质，或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
泵（或20ml注射器筒）；天平；单面刀片；保温箱（或恒温水浴）；刻度试管（15ml）；移液管（5ml×2，2ml×8，1ml×2）。【试剂】亚硝酸钠标准液 称取分析纯NaNO2 0.1000g水溶后定容至100ml，吸取5ml用水稀释定容至1000ml，即为每ml含NaNO2 5μg（亚硝态氮近似1μg/ml）的标准液。0.1mol/L pH7.5的磷酸缓冲液：K2HPO4 19.24g，KH2PO4 2.2g，加水溶解后定容至1000ml。1%（W/V）对-氨基苯磺酸溶液：称取1.0g加入25ml浓
在使用前现加，其他抑制剂成分可以在水溶液中稳定 5 天。 二、各种成分在工作液中的终浓度 Tris-HCl：50 mM，pH 7.4 NP-40：1% 去氧胆酸钠：0.25% NaCl：150 mM EDTA：1 mM PMSF：1 mM 抑蛋白酶肽，亮抑酶肽，胃蛋白酶抑制剂：各 1 μg/ml Na3VO4：1 mM NaF：1 mM 三、实验步骤 转染后 24～48 h 可收
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