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文献和实验- 120%,且标准曲线 R2≥ 0.99,引物的扩增效率才是合格的,定量出来的 CT值才可以用来计算。且扩增效率越接近 100%,引物的扩增性能越优。 1、若扩增效率不满足 90 - 120%,那 CT值偏大是因为扩增效率不达标导致的,需要重新设计引物。 2、若引物的扩增效率满足 90 - 120% 前提下,CT 值仍然很大,则是基因本身表达量低造成的 CT 值偏大,可以提高模板的添加量,但最根本的方法是改为探针法进行定量。探针法的灵敏度是高于染料法的。
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