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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 供应商:
上海碧云天生物技术有限公司
- 规格:
500μl
碧云天生产的BeyoFast™系列快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5-15分钟内仅使用一种缓冲液就能快速完成DNA酶切的高品质限制性内切酶。
BeyoFast™系列快速内切酶适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。
BeyoFast™系列快速内切酶具有如下优点。(1) 5-15分钟内就能完成酶切;(2) 所有BeyoFast™系列内切酶共用一种酶切缓冲液CutEZ™ Buffer,大大简化酶切反应体系,方便进行双酶切或多酶切;(3) 针对不同酶在CutEZ™ Buffer中活性存在差异的问题,调整了不同酶的浓度,可以统一按照每20μl体系加入1μl酶量的用量进行酶切反应;(4) Alkaline Phosphatase、Antarctic Phosphatase、T4 DNA Ligase、T4 Polynucleotide Kinase、T4 PNK (3' phosphatase minus)等很多修饰酶等都100%兼容CutEZ™ Buffer (具体的兼容性表请参考https://www.beyotime.com/product/D6018.htm),使“酶切-连接”和“酶切-修饰-连接”等反应体系可以兼容,支持一管化反应;(5) 良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。
酶活性检测:最适反应温度下,在20μl反应体系中,1μl BeyoFast™ HinfI能够在15min内完全消化1μg λDNA。
长时间酶切检测:最适反应温度下,将1μl BeyoFast™ HinfI与1μg λDNA共同温育3h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。
酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1μl BeyoFast™ HinfI消化底物,回收酶切产物,在22℃下使用适量T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
BeyoFast™ HinfI快速内切酶基本信息如下:
| 识别序列 | 同裂酶 | 酶切温度 | 失活条件 | 甲基化干扰? |
| 5'-G^ANTC-3' 3'-CTNA^G-5' |
无 | 37℃ | 80℃ 20min | 有时有干扰 |
BeyoFast™ HinfI快速内切酶在不同反应缓冲液中的活性(缓冲液兼容性)如下:
| Beyotime CutEZ™ Buffer | Beyotime Easy-Load™ CutEZ™ Buffer | Thermo FastDigest Buffer | NEB CutSmart® Buffer | Takara QuickCut™ Buffer |
| 100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
注:活性数据来自碧云天BeyoFast™系列快速内切酶的标准反应体系下的检测。
BeyoFast™ HinfI快速内切酶识别位点的甲基化影响请参考下表:
| Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
| 无影响 | 无影响 | 序列可能重叠 剪切受阻 |
无影响 | 序列可能重叠 剪切阻断 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D5745-500μl | BeyoFast™ HinfI | 500μl |
| D6018-1ml | 10X CutEZ™ Buffer | 1ml |
| D6020-1ml | Easy-Load™ 10X CutEZ™ Buffer | 1ml |
| - | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,两年有效。
注意事项:内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。
不含核酸酶的超纯水推荐选购碧云天的ST876 BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)。
如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。
同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性,遇到可能存在甲基化干扰问题时,可以尝试同裂酶。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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