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5
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Rapid—Trypsin(MS)
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-20℃
- 规格:
20 μg
产品详情
本产品属于质谱级别的基因工程酶,是一种丝氨酸肽链内切酶,可特异性切割赖氨酸(K)及精氨酸(R)C末端肽键,可广泛用于蛋白组学研究中的蛋白酶解,适用于多种类型样本,包括但不限于动物组织来源的样本、细胞样本及IP样本等。
产品优势
1.3h即可完成酶切。
2.漏切率低于其它竞品品牌。
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文献和实验多维色谱 在很多情况下,利用,色谱处理蛋白质时,要在分离前把蛋白质消化成多肽。这样处理的好处是肽在很多溶剂中更加易于溶解(特别是膜蛋白的肽),因而比母体蛋白质更容易分离。缺点是需要处理的肽种类会有一个数量上的巨大增加。在偶联柱分馏之后,馏出物直接送到质谱仪器,样品可能会因其复杂性太高而不能进行合适的分析。虽然质谱技术在快速进步,但是它的动态范围测量能力还是比哺乳动物细胞表达蛋白质的范围低2~3个数量级。在最早的一份报道中,Opiteck等人(Opiteck
从二维凝胶电泳到基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI―TOF―MS)需要有一个胶后处理系统,包括凝胶的图像扫描和分析、蛋白质斑点切割、酶解和MALDI靶上点样等步骤,其自动化程度的高低是蛋白质组研究能否达到高通量、高灵敏度和高准确性的关键步骤之一。 快速银染的蛋白质点进行胶上酶解的主要步骤如下: 1. 清洗和脱色:将蛋白质点用切胶仪切胶,置于96孔板中。在含有胶粒的每个孔中加入200/A1脱色液(100mmol/L硫代硫酸钠和30mmol/L铁氰化钾溶液按照1:1混合
能性。 ( 2 ) 切取蛋白质点面积过大不利于蛋白质的鉴定。因为面积过大会增加化学噪音背景,降低胰蛋白酶在蛋白点中的渗透能力,不利于蛋白酶扩散到蛋白点凝胶中。 ( 3 ) 双向电泳中,在进行 SDS-PAGE 之前的平衡过程中蛋白质被还原(一般采用 DTT 或 β-巯基乙醇)和烷基化(一般采用碘乙酰胺或碘乙酸)。这样打断了半胱氨酸残基之间的二硫键,从而可防止蛋白质形成二级和三级结构来干扰蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移。对于一向电泳分离的蛋白质而言,在胶内酶解之前,必须进行还原和烷基化 (见第 22 章










