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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 英文名:
Salmonella paratyphi A
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
产品名称:甲型副伤寒/沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Salmonella paratyphi A
产品规格:50T
保存及有效期:请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:样品模板
产品特点:
1. 一站式,用户不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。
甲型副伤寒/沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒包装规格及成分(具体信息详见说明/书):
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 说明/书 |
使用手册 | 1 份 |
甲型副伤寒/沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒注意事项:
1.所有操作严格按照说明/书进行;
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,最好在PCR扩增程序结束
上的DNA定量。这是DNA定量技术的一次飞跃。 根据最终得到的数据不同,定量PCR可以分为相对定量和绝对定量两种。典型的相对定量如比较经过不同方式处理的两个样本中基因表达水平的高低变化,得到的结果是百分比;绝对定量则需要使用标准曲线确定样本中基因的拷贝数或浓度。根据所使用的技术不同,荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言,探针杂交技术在原理上更为严格,所得数据更为精确;荧
(1) 试剂:mixer尽量分装,不要原瓶多次取用。 (2) 加样:原则是DNA最后加,其他试剂按照体积大小从大往小的加。如果是同种引物和探针有多管的话只是DNA不同,那么采取的方法是算出总体积后加在一个管子里面,混合均匀之后再分装到各个管子里去,这样可以有效地避免误差及污染。 另外,普通实验室容易污染,且污染程度很高,与跑电泳还有质粒制备提取都在同一个房间里有比较大的关系,最容易造成高浓度污染的就是产物的开盖和质粒的稀释。 目前,国内外各个公司提供的诊断试剂盒大多采用了UNG










