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文献和实验损坏凝胶或将样品槽底部凝胶刺穿。 2)电泳:加完样后,插上导线,打开 电泳仪 电源,按照需要调节电压至120V,电泳开始,观察电流情况或电泳槽中负极的铂金丝是否有气泡出现。 3)当溴酚蓝条带移动到距凝胶前沿约1cm时,将电压(或电流)回零,关闭电源,停止电泳。 4)取出凝胶,在紫外观测仪上观察电泳结果。在波长为302nm紫外灯下观察染色后的或已加有EB的电泳胶板。DNA存在处显示出肉眼可辨的桔红色荧光条带。紫光灯下观察时应戴上防护眼镜或有
。PAGE凝胶电泳后在X-光片上放射自显影或用Phosphoimager仪扫描测定3h。同位素法的优点是灵敏度高,100个永生化细胞27个循环即可检出,缺点是存在放射性污染,且放射自显影需8h至两天以上时间,时间较长。 3.2 染色法 电泳后用SYBR green或EB染色,然后紫外灯下观察或用CCD图像系统测定。EB在302nm紫外透射仪和桔红色紫外滤光片下效果最好,可得与SYBR green相近的敏感性。染色法简便,快速,灵敏度为100个永生化细胞30个循环,由于染色带的信号强度不能精确
作者:刘佳 洪炜 孙志强 毛远丽 作者单位:解放军第302医院临检中心 近年来,为了弥补传统溶液化学分析的不足,在临床化学分析中越来越多的实验室开始采用干式多层复合薄膜化学(Dry,thin,multiayer film,简称:干化学)分析。所谓干化学分析是与传统溶液分析相对而言的,即将所需分析试剂全部固化在多层复合膜上,分析时只需将少量待检样品(约10ul)加在膜上即可进行定性或定量分析[1],美国强生VITROS 250干化学分析仪是属于这类仪器。
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