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- xuanya
- XY-PCR3816
- 国产/进口
- 2025年09月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10
- 英文名：
Fonsecaea spp.
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
产品名称：着色霉染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Fonsecaea spp.
产品规格：50T
保存及有效期：请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：样品模板
产品特点：
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
着色霉染料法荧光定量PCR试剂盒包装规格及成分（具体信息详见说明书）：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 说明书 |
使用手册 | 1 份 |
着色霉染料法荧光定量PCR试剂盒注意事项：
1.所有操作严格按照说明书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验，不靠壁，不贴液面。 混匀平均分装的注意事项： 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下，以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀，不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) （FQ
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
