20mm蓝色通用冻存管盖1

培养细胞的冻存及复苏

3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 （4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 （5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记。 （6）冻存：在特殊的 仪器 或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当

细胞培养的操作步骤

检查，一定要盖紧，做好标记。 （6）冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。 操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。 2. 复苏细胞 （1）从罐中取出冻存管。 （2）迅速放入36℃～37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成。 （3）冻存管用70％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中

淋巴细胞的保存和细胞活力测定

冷冻保存技术 　　利用液氮深低温（－196℃）环境保存细胞，是当前世界上通用的细胞长期保存技术。其原理在于深低温环境可中断细胞的代谢，但在降温过程由于冰晶的形成和渗透压的改变均可导致细胞的损伤和部分死亡，所以在冷冻过程中一定要加用冷冻保护剂，常用的保护剂为二甲亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）。冷冻时的降温速度和细胞解冻时的升温速度对细胞活力的保存有很大影响。条件合适时，冻存细胞一旦复苏，恢复37℃培养，其形态和代谢活动均可恢复正常。操作的原则是先对需冻存的细胞作活