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文献和实验。 总起来,结果还比较满意,可以看到,PEG浓度越高,能沉淀出来的DNA片段越小,并且,PCR反应体系里面的盐离子对PEG沉淀影响似乎不大,我测序的标本都在300bp以上,所以,最终选择的PEG浓度为12%。 方法 96孔PCR板操作。 1. 20μLPCR产物加入5 μL 5M的NaCl(终浓度0.5 M)。 2. 加入25 μL 24%的PEG8000溶液(终浓度12%);混匀。 3. 4度放置30 min。 4. 4500 g,4℃离心30 min 后,立即
PCR板 8x12 (无裙边,半高裙边,带裙边-按SBS标准) 模块温度控制范围 4 °C - 99 °C 温控模式 模块温控,(模拟)PCR管温控;在梯度操作模式下可以采用上述两种温控模式 模块加热技术 Peliter 半导体元件,三组回路技术 梯度模块 12 道 梯度范围 1°C - 24 °C 梯度温度范围 30 °C - 99 °C 热盖温度范围 37 °C - 110 °C 热盖下降和关闭压力 ESP技术,最大20 kg/PCR 板 温度均一性20°C - 72 °C ≤
现在的PCR仪如ABI,Eppendorf的一般具有两种温控模式,即模块温控模式(Block-control)和反应管温控模式)(tube-control)。在模块温控模式下,机器根据探测器直接探测的温控模块(即承载样品的金属台)的温度进行控制,这种模式适用于长时间的静态孵育(如连接、酶切、去磷酸化等)。反应管温控模式实际上是一种模拟试管/PCR板的温控模式,根据探测器所探测到的温控模块的温度由计算机计算出管内/PCR板孔内样品液的温度来进行控制。一般说来,试管温控更为准确,因为管内样品
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