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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
24
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 马源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4255 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| RatFollistatin,FSELISAKit大鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 荧光素标记0酸化血小板源性生长因子受体-B抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Elisa圆环病毒IgGELISA试剂盒5*96孔5*96孔 | Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) /FITC 荧光素标记0酸化p21激活激酶1/2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| ELISAKitTIEG1大鼠TGF-β诱导早期基因1规格:48T/96T | Anti-Syndecan-1/CD138/FITC 荧光素标记多配体聚糖抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanplacetallactogen,PLELISAKit人胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-GFP 绿色荧光蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| ELISAKitβ2-GP1AbIgA人β2糖蛋白1抗体IgA规格:48T/96T | Anti-HHV8/ORF50/FITC 荧光素标记人类疱疹病毒8抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit人结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-Phospho-c-Fos (Thr232) 0酸化c-fos抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| humanglycoprotein49A,Gp49aELISAKit人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-VEGFR1 血管内皮生长因子受体1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-DAT1 多巴胺转运蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 2D3/DVD/DHVD3OH人1,25二羟基维生素D3规格:48T/96T | Anti-Myelin P0 protein/FITC 荧光素标记外周髓0脂P0蛋白/P0蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit人能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-USF-1 等上游刺激因子1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| Humanlumican,LUMELISAKit人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti- Beta-Actin/Gold 金标记β-肌动蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humahymopein,TP-5ELISAKit人胸腺五肽(TP-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-AU1 tag AU1 tag标签抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3规格:48T/96T | 马源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化埃兹蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKit人胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-PAX3 配对盒基因3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| HumanBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-MLK3 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
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文献和实验荧光定量PCR简介荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据有关统计,在 Medline 数据库中,用“Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索,1996 年是19 篇,1999 年157 篇,到2003 年
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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