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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 驴源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4252 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | 5-HTR1A (5-HT1A (5-hydroxytryptamine/serotonin receptor 1A; 5HT1a; ADRBRL1; ADRB2RL1; HTR1A) 5-羟色胺受体1A(多肽) 0.5mg |
| 细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒 ,英文名: CK-18 ELISA Kit | ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov 肾上腺髓质素蛋白(N端20肽) 0.5mg |
| RatChorionicGonadoophin,CGELISAKit 大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | FT4 游离T4 96T |
| Humanai-IVIgGaibodyELISAKit 人抗IVIgG抗体ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | HSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit 人热休克蛋白70 96T |
| Beta Agonists(β-)免疫试剂盒 Beta Agonists ELISA Kit | SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0酸协同转运蛋白抗原 0.5mg |
| 对虾皮下和造血器官坏死病毒(HHNV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T | Citrate buffer powders(0.01M pH6.0) packages 柠檬酸盐缓冲液(抗原热修复试剂)(0.01M pH6.0) 1000ml |
| 可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒 ,英文名: sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit | EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子 96T |
| Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Human Glycated hemoglobin A1c,A1c ELISA Kit 人糖化血红蛋白A1c 96T |
| 嗜肺军团杆菌(LP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T | SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽 0.5mg |
| 孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)ELISA试剂盒 ,英文名: PAQR7 ELISA Kit | NRG-1(human Neuregulin 1) ELISA Kit 人神经调节蛋白1 96T |
| 氧化酶(XOD)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 | NT-3 ELISA Kit 人神经营养因子3 96T |
| HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit 人状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | AChRab-M1 ELISA Kit 大鼠乙酰胆碱受体-M1抗体 96T |
| 鱼葡萄糖激酶(GCK)免疫试剂盒 Fish Glucokinase,GCK ELISA kit | 驴源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Bacillus anthraci 炭疽杆菌菌体蛋白 0.5mg |
| HumanVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶 96T |
| 糖还原酶(AR)ELISA试剂盒 ,英文名: AR ELISA Kit | bFGF-9 ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子9 96T |
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文献和实验如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
标记(生物素、荧光、地高辛和Eu3+等)、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时,根据不同的实验目的,需要注意一些相应的事项,总结如下: 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物,而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求: 确保模板是cDNA
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
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