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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大豆源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4225 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Ratfreefattyacids,FFAELISAKit大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HumanL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit人L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T | phospho-TrkB (Tyr515) 英文名称: 0酸化酪酸激酶B抗体 0.1ml |
| Duckviruseeritis,DEVELISAKit鸭病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Humahyroglobulin,TGELISAKit人甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | NOXA2 英文名称: NADPH氧化酶活化蛋白1抗体 0.1ml |
| ELISAKitTLR-9/CD289大鼠Toll样受体9规格:48T/96T | Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TSPAN10 英文名称: 四分子交联体10抗体(四旋蛋白) 0.2ml |
| Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HINT1 英文名称: 组酸三聚体核苷结合蛋白1抗体 0.1ml |
| Humanprealbumin,PAELISAKit人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HumanBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒规格:96T/48T | phospho-NIFK (Thr238) 英文名称: 0酸化NIFK抗体 0.1ml |
| humancoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit人促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Granzyme K 英文名称: 颗粒酶K抗体 0.2ml | MUC7 英文名称: 粘蛋白7抗体 0.2ml |
| HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit人糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒规格:96T/48T | phospho-GATA3 (Ser308) 英文名称: 0酸化GATA结合蛋白3抗体 0.1ml | TASK 3 英文名称: 酸敏感性离子通道蛋白抗体 0.2ml |
| MouseE-SelectinELISAKit小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 大豆源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Maltoporin 英文名称: 麦芽糖孔蛋白抗体 0.2ml | KLF17 英文名称: 锌指蛋白393抗体 0.2ml |
| HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒规格:96T/48T | ROCK2 英文名称: Rho相关蛋白激酶2抗体 0.1ml | PTOP 英文名称: 肾上腺皮质发育异常同源蛋白抗体 0.2ml |
| Humanalcoholdehydrogenase,ADHELISAKit人乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IKK alpha + IKK beta 英文名称: KB抑制蛋白激酶α/β抗体 0.2ml | PCDHB7 英文名称: 原钙粘蛋白β7抗体 0.2ml |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验的,为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中,最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案,用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步:DNA提取,我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质,然后将DNA吸附在层析柱上,经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段:(1)通过加热
如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
标记(生物素、荧光、地高辛和Eu3+等)、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时,根据不同的实验目的,需要注意一些相应的事项,总结如下: 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物,而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求: 确保模板是cDNA
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